[发明专利]龙眼叶乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱的建立方法

权利要求书

1.一种龙眼叶乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.供试品溶液的制备：取龙眼叶粗粉2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，先加20ml 95％乙醇超声1h，再加入20ml 50％乙醇超声30min，过滤，滤液蒸干，加水混悬于分液漏斗，加入等量石油醚反复萃取，至萃取出的石油醚层无色，取下层溶液，再加入等量乙酸乙酯反复萃取，直至萃取出的乙酸乙酯层无色，合并乙酸乙酯层，蒸干，精密加入甲醇2ml，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；

S2.对照品溶液的制备：取没食子酸乙酯、紫云英苷和槲皮素对照品，精密称定，加甲醇制成各对照品的浓度为0.1mg/ml的混合溶液；

S3.色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；紫外检测波长为280nm；流速为1.0ml/min；柱温为30℃；流动相A为甲醇，流动相B为0.2％磷酸溶液，梯度洗脱程序为：0～50min，15％→26％A，50～120min，26％→45％A，120～150min，45％A；

S4.测定：精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，分别注入高效液相色谱仪，按照步骤S3方法测定，记录150min内的图谱，得到指纹图谱。

2.根据权利要求1所述的龙眼叶乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述步骤S2中对照品溶液的制备方法为：取没食子酸乙酯、紫云英苷、槲皮素对照品各1mg，精密称定，置10ml容量瓶，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得各对照品的混合溶液。

3.根据权利要求1至2中任一所述的龙眼叶乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱为：Thermo C₁₈柱，250mm×4.6mm，粒度5μm。

4.如权利要求1-3所述的建立方法所得的龙眼叶乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱，其特征在于，所述龙眼叶乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱中有12个共有指纹峰，其中5号峰为没食子酸乙酯，11号峰为紫云英苷，12号峰为槲皮素。

5.根据权利要求4所述的龙眼叶乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱，其特征在于，所述指纹图谱在龙眼叶的真伪鉴别、基源鉴别中的应用。

6.根据权利要求4所述的龙眼叶乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱，其特征在于，所述指纹图谱在龙眼叶提取物及其制剂检测中的应用。

7.根据权利要求4所述的龙眼叶乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱，其特征在于，所述指纹图谱在龙眼叶乙酸乙酯提取物及其制剂检测中的应用。