[发明专利]血液破壁生长因子的制备方法及其应用

权利要求书

1.血液破壁生长因子的制备方法，其包括以下步骤：

-分离血液，以获得高浓度血小板血浆；

-裂解高浓度血小板血浆，以获得生长因子提取液；

-过滤生长因子提取液，以去除污染物；以及

-任选地，冷冻干燥经过滤的生长因子提取液。

2.如权利要求1所述的方法，其中还包括在所获得的高浓度血小板血浆中加入缓冲剂以使其pH值稳定的步骤；优选地，所述缓冲剂为HEPES缓冲液、磷酸盐缓冲液或生理盐水。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述分离血液的步骤通过离心来实现；优选地，所述离心条件如下：800-2300克/分钟；更优选地，所述离心进行3次。

4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述裂解高浓度血小板血浆的步骤通过冷冻/重溶、超声或研磨来实现；优选地，所述冷冻/重溶条件如下：-50℃至-60℃冷冻20-30分钟，35℃至40℃重溶5-15分钟；更优选地，所述冷冻/重溶进行至少2次；或者优选地，所述超声条件如下：185W，40kHz超声10-20分钟。

5.血液破壁生长因子的制备方法，其包括以下步骤：

-血液以800-2300克/分钟离心3次，获得高浓度血小板血浆；优选地，第1次离心5-10分钟，第2次离心5-10分钟，第3次离心10-20分钟；

-高浓度血小板血浆通过至少2次冷冻/重溶，或者至少10分钟超声裂解，获得生长因子提取液；优选地，所述冷冻/重溶条件如下：-50℃至-60℃冷冻20-30分钟，35℃至40℃重溶5-15分钟；更优选地，所述冷冻/重溶进行2至5次；或者优选地，所述超声条件如下：185W，40kHz超声10-20分钟；以及

-任选地，生长因子提取液经过滤后，进行冷冻干燥保存。

6.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述破壁生长因子主要包括VEGF、EGF及PDGF。

7.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述血液源自以下动物：哺乳类、鸟类、爬行类、两栖类及鱼类；优选地，所述血液源自鱼类。

8.如权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述破壁生长因子的半衰期为12个月或以上。

9.由权利要求1至7中任一项所述的方法制备的破壁生长因子，其用于皮肤创伤愈合、皮肤再生、皮肤美白、或者皮肤抗氧化/抗衰老。

10.由权利要求1至7中任一项所述的方法制备的破壁生长因子，其在用于制备以下用品中的用途：

-皮肤再生用品；

-皮肤美白用品；

-皮肤抗氧化/抗衰老用品；或者

-协助皮肤创伤愈合的用品。