[发明专利]一种从北葶苈子中提取的北葶新碱I及其制备方法与应用在审
申请号: | 201810030386.9 | 申请日: | 2018-01-12 |
公开(公告)号: | CN108250259A | 公开(公告)日: | 2018-07-06 |
发明(设计)人: | 李孟;曾梦楠;张志广;张贝贝;郑晓珂;张靖柯;吕锦锦;赵璇;冯卫生 | 申请(专利权)人: | 河南中医药大学 |
主分类号: | C07H19/06 | 分类号: | C07H19/06;C07H1/08;A61P9/00 |
代理公司: | 郑州天阳专利事务所(普通合伙) 41113 | 代理人: | 聂孟民 |
地址: | 450046 河南*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 制备 葶苈子 新碱 浓缩干燥 柱色谱 心肌细胞损伤 乙醇梯度洗脱 浓缩 上清液浓缩 乙醇洗脱液 甲醇洗脱 煎煮提取 应用问题 有效解决 组分用水 合并 上清液 醇沉 醇味 高脂 洗脱 应用 溶解 保留 治疗 | ||
1.一种从北葶苈子中提取的北葶新碱I,其分子结构式为:
2.权利要求1所述的从北葶苈子中提取的北葶新碱I的制备方法,其特征在于,取北葶苈子在240℃下炒制5.5min,每次加北葶苈子10倍重量的水煎煮提取三次,每次1.5h,合次三次提取液,减压浓缩至相当于含生药量2g/mL的浸膏状,室温下,浓缩的浸膏用浸膏体积5倍、体积浓度为80%的乙醇醇沉,静置1h,收集上清液,再加入浸膏体积5倍、体积浓度为80%的乙醇醇沉,如此反复操作4次,将所得上清液浓缩至无醇味,上Dianion HP-20柱,依次用水、体积浓度20%、40%、60%乙醇梯度洗脱,流速6mL/min,每个部位的流动相用量为柱体积的10倍,收集体积浓度60%乙醇洗脱液,浓缩干燥,得组分A;加组分A的5倍重量的水溶解,20℃下6000rpm离心15min,所得上清液记为水溶物组分B1,沉淀记为水不溶物组分B2;组分B1在45℃下减压浓缩至原体积的28-29分之一,通过Toyopearl HW-40柱色谱,用水洗脱,流速6mL/min,合并500-800mL之间的流份标为组分C2;组分C2通过Sephadex LH-20柱色谱,用甲醇洗脱,流速1mL/min,合并80-150mL之间的流份标为组分D1,组分D1通过半制备HPLC,上规格型号为:250×10mm,粒径5μm,孔径12nm的YMC-Pack ODS-AA色谱柱,流动相为乙腈︰三氟乙酸水溶液=11︰89,所述的三氟乙酸水溶液为每1000mL水中加入300μl三氟乙酸混匀制成,流速2.5mL/min,收集保留时间tR=12.5~13.5min的流份,浓缩干燥,得到化合物北葶新碱I。
3.根据权利要求2所述的从北葶苈子中提取的北葶新碱I的制备方法,其特征在于,取北葶苈子10kg用清炒法,在240℃下炒制5.5min,每次加100kg的水煎煮提取三次,每次1.5h,合次三次提取液,减压浓缩成5000mL的浸膏状,室温下,浓缩的浸膏用体积浓度为80%的乙醇25L醇沉,静置1h,收集上清液,再加入体积浓度为80%的乙醇25L醇沉,如此反复操作4次,将所得上清液浓缩至无醇味,上Dianion HP-20柱,依次用水、体积浓度20%、40%、60%乙醇梯度洗脱,流速6mL/min,每个部位的流动相用量为柱体积的10倍,收集体积浓度60%乙醇洗脱液,浓缩干燥,得组分A;组分A加入5倍重量的水溶解,20℃下6000rpm离心15min,所得上清液记为水溶物组分B1,沉淀记为水不溶物组分B2;组分B1用旋转蒸发仪在45℃下减压浓缩至原体积的28-29分之一,通过Toyopearl HW-40柱色谱,用水洗脱,流速6mL/min,合并500-800mL之间的流份标为组分C2;组分C2通过Sephadex LH-20柱色谱,用甲醇洗脱,流速1mL/min,合并80-150mL之间的流份标为组分D1,组分D1通过半制备HPLC,上规格型号为:250×10mm,粒径5μm,孔径12nm的YMC-Pack ODS-AA色谱柱,流动相为乙腈︰三氟乙酸水溶液=11︰89,所述的三氟乙酸水溶液为每1000mL水中加入300μl三氟乙酸混匀制成,流速2.5mL/min,收集保留时间tR=12.5~13.5min的流份,浓缩干燥,得到化合物北葶新碱I。
4.权利要求1所述的北葶苈子中提取北葶新碱I在制备治疗脂多糖造成心肌细胞损伤的药物中的应用。
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