[发明专利]一种EV71病毒IgA抗体检测试纸条有效

专利信息
申请号: 201810036090.8 申请日: 2018-01-15
公开(公告)号: CN108267577B 公开(公告)日: 2020-10-09
发明(设计)人: 王长兵;朱冰;李英华;邝璐;韩宁;陈翊;许甜甜;林正方 申请(专利权)人: 广州市妇女儿童医疗中心
主分类号: G01N33/533 分类号: G01N33/533;G01N33/569
代理公司: 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 代理人: 刘明星
地址: 510000 *** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 ev71 病毒 iga 抗体 检测 试纸
【说明书】:

发明公开了一种EV71病毒IgA抗体检测试纸条。它包括样品垫、标记垫、硝酸纤维素膜、吸水纸和背板,其特征在于,所述的硝酸纤维素膜上设有含有抗原的检测线和人IgA抗体的对照线,标记垫中含有抗人IgA抗体量子微球标记物;所述的抗原包括EV71病毒VP2蛋白抗原多肽,其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1。本发明比较适合幼儿园筛选手足口病毒,不需要专业的医务人员就可以筛查疑是感染幼儿,可以避免EV71病毒在幼儿园传播扩散。本发明也适合家庭诊断,家长可以提前了解子女的病情,并及早送至医院进行诊疗,缩短病程。

技术领域

本发明属于医学检验领域,具体地公开了一种EV71病毒IgA抗体检测试纸条。

背景技术

EV71病毒属于肠道病毒一员,一般感染6岁以下儿童,常见症状主要包括发绕、食欲不振、咽喉痛、口腔溃疡、手部脚部水泡等,严重的可导致无菌性脑膜炎、脑炎、脊髓灰质炎样麻痹及神经源性肺水肿等严重的中枢神经系统并发症,并引起死亡。EV71病毒发病有一定的季节性,一般4-7月为病毒感染的高发期,其它月份有零星感染病例,是儿童群体中死亡人数最多的病毒。目前EV71病毒没有特殊的药物可以治疗,临床上基本是对症治疗,严重的病患一般采用丙球蛋白和激素保守治疗方案。EV71的预防主要方式还是通过早期诊断及早隔离病患防治病毒传播,因此有必要开发一种适合幼儿园早期诊断EV71病毒的检测方法。

EV71病毒早期诊断方法包括病毒分离培养、RT-PCR荧光检测方法、血清IgM抗体检测方法等。病毒分离培养方法是确证EV71病毒感染的金标准方法,但是由于实验条件和诊断时间等缺陷,目前该方法主要应用于实验室,无法在临床上使用该技术。RT-PCR荧光检测技术是EV71病毒检测临床上推广最好的检测方法,优点是灵敏度高。但是由于RT-PCR荧光检测技术需要严格认证的实验室条件、昂贵的荧光检测仪、专业培训的技术员,因此无法在社区诊所、幼儿园等基层单位推广。血清IgM抗体检测方法主要是检测患者血清中IgM抗体判断EV71病毒感染情况,主要的技术方式包括酶联免疫技术和胶体金快速层析技术,存在一定的假阳性和假阴性。

发明内容

本发明的目的是提供一种灵敏度高、准确性高,能高效快速检测EV71病毒的EV71病毒IgA抗体检测试纸条及其检测方法。

本发明主要是利用量子点标记物信号放大的优势,提高免疫诊断的灵敏度。量子点具有灵敏度高、稳定性好、荧光寿命长等优势,是新一代荧光标记物最佳选择。量子点技术在2003年被Science杂志评为年度十大科学突破之一。本发明的检测对象是人唾液中IgA抗体,通过检测患者唾液中的EV71病毒IgA抗体判断EV71病毒感染的情况。

本发明的EV71病毒IgA抗体检测试纸条,包括样品垫、标记垫、硝酸纤维素膜、吸水纸和背板,其特征在于,所述的硝酸纤维素膜上设有包被抗原的检测线和人IgA抗体的对照线,标记垫中含有抗人IgA抗体量子微球标记物;

所述的抗原包括EV71病毒VP2蛋白抗原多肽,其氨基酸序列如序列表SEQ IDNO.1。

优选,所述的抗原的包被浓度为0.2-2mg/ml。

优选,所述的人IgA抗体包被浓度为0.5-3mg/ml。

优选,所述的抗原是EV71病毒VP2蛋白抗原多肽与BSA蛋白的交联产物。

进一步优选,所述的抗原是采用马来酰亚胺基苯甲酸琥珀酰亚胺酯作为交联剂,将EV71病毒VP2蛋白抗原多肽与BSA蛋白交联后的交联产物。

再进一步优选,所述的EV71病毒VP2蛋白抗原多肽与BSA蛋白的交联产物是通过以下方法制备的:

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