[发明专利]一种酶促变温高通量制备葡萄糖基甜菊糖苷的方法

权利要求书

1.一种酶促变温制备葡萄糖基甜菊糖苷的方法，其特征在于，用环糊精葡萄糖基转移酶为催化剂，以甜菊糖苷为糖基受体，糊精或寡糖为糖基供体，以盐和多元醇为酶复合稳定剂，水相酶促变温下高通量制备葡萄糖基甜菊糖苷；

具体的制备方法为：在80-85^oC 下将甜菊糖苷和糖基供体溶于去离子水或pH5-6.5的磷酸-磷酸铵缓冲液，冷却到60-65^oC 后，向其中加入10-100U/g 甜菊糖苷的环糊精葡萄糖基转移酶及酶稳定剂，保持温度开始反应0.5-5h，然后升温到70-76^oC反应8-24h，最后升温到75-85^oC反应8-24h，至原料甜菊糖苷含量的变化低于每小时0.1%时结束反应；

其中，所用的环糊精葡萄糖基转移酶为来源于Geobacillus sp. 菌株生产的环糊精葡萄糖基转移酶或其固定化酶；

甜菊糖苷水溶液的质量浓度为10%-25%，甜菊糖苷：糖基供体按质量比为1:0.3-1:1.1；

酶复合稳定剂为钙钡离子盐和多元醇的混合物，钙钡离子盐为氯化钙和氯化钡中的一种或两者的混合物，添加量为酶蛋白质量的0.1%-1%；多元醇为甘油或山梨醇中的一种或两者的混合物，添加量为酶蛋白质量的0.1%-5%。

2.根据权利要求1所述的一种酶促变温制备葡萄糖基甜菊糖苷的方法，其特征在于，所用的甜菊糖苷为从甜叶菊中提取的，或者是用发酵法或酶催化合成的任意一种或多种甜菊糖苷的混合物。

3.根据权利要求1所述的一种酶促变温制备葡萄糖基甜菊糖苷的方法，其特征在于，所述的糖基供体为糊精或寡糖；其中糊精为麦芽糊精、玉米淀粉糊精、木薯糊精、各种环糊精中的一种或两种的混合物；寡糖为麦芽糖、麦芽三糖、棉子糖和蜜二糖一种或多种的混合物。

4.根据权利要求1所述的一种酶促变温制备葡萄糖基甜菊糖苷的方法，其特征在于，产物经直接喷雾干燥或者稍经浓缩并干燥即得葡萄糖基甜菊糖苷粗产品，残余的糊精或其它还原糖经大孔吸附树脂吸附后用水洗脱。