[发明专利]结核分枝杆菌变态反应原组合物及其制备方法与应用

说明书

本发明提供一种结核分枝杆菌变态反应原组合物及其制备方法与应用。本发明的结核分枝杆菌变态反应原组合物由CFP10融合蛋白和Esat‑6重组蛋白(SEQ ID NO:2)等量混合而成。其中，所述CFP10融合蛋白是由n个如SEQ ID NO:3所示的结核分枝杆菌抗原蛋白Rv3874的T细胞表位肽之间通过Linker串联得到。按照上述设计合成基因序列，转入原核表达系统，表达蛋白质，纯化后等量混合，作为皮试反应原，用于结核病感染的诊断等相关领域。

技术领域

本发明涉及分子生物学和免疫学领域，具体地说，涉及一种结核分枝杆菌变态反应原组合物及其制备方法与应用。

背景技术

结核病是慢性传染性疾病。目前全球已有20亿人感染结核菌，活动性结核患者达1500万，每年新发结核患者达800万～1000万，有180万人因结核病死亡。1993年世界卫生组织(WHO)宣布“全球结核病处于紧急状态”，将结核病列为重点控制传染病之一。1998年WHO再次指，“遏制结核病行动刻不容缓”。

据WHO《2008年全球结核病控制报告》估计，2006年我国结核病发病人数为131万，占全球的14.3％，位居全球第二位，是全球22个结核病高负担国家之一。2010年全国结核病流行病学抽样调查结果显示，我国结核病疫情特点是：感染人数多，全国有5亿人口已感染结核菌，明显高于全球平均感染水平；患者数多，全国有活动性肺结核患者约500-600万，其中传染性肺结核患者约86万；死亡人数多，农村患者多，全国约80％肺结核患者在农村，而且主要集中在中西部地区；耐药患者多，特别是耐多药和广泛耐药患者人数多。

在我国传染病疫情网络报告中，肺结核报告发病和报告死亡数位居甲、乙类传染病前列。肺结核患者中的3/4为最具有劳动能力的青壮年。结核病仍是制约农村地区特别是贫困地区经济和社会发展的重大疾病之一。同时，我国结核病防治工作还面临着流动人口结核病、耐多药结核病和结核菌/艾滋病病毒双重感染等新的挑战。

结核菌可能侵入人体全身各种器官，但主要侵犯肺脏，称为肺结核病。结核病是青年人容易发生的一种慢性和缓发的传染病。潜伏期4～8周。其中80％发生在肺部，其他部位(颈淋巴、脑膜、腹膜、肠、皮肤、骨骼)也可继发感染。人与人之间呼吸道传播是本病传染的主要方式。传染源是接触排菌的肺结核患者。随着环境污染和艾滋病的传播，结核病发病率越发强烈。除少数发病急促外，临床上多呈慢性过程。常有低热、乏力等全身症状和咳嗽、咯血等呼吸系统表现。

WHO估计每年大约有300万的结核患者未被检测到，不仅使得结核感染患者不能及时诊治，同时也加大了家庭和社会群体之间的传播风险。不利因素提醒我们在结核病控制中早期筛查尤为重要，在《柳叶刀》的一篇结核相关文献中，提出了一个重要的观念变革--在世界范围内推广“在高危群体中去主动发现病人。”结核的高危人群主要包括两类。一是和结核确诊患者有密切接触的亲属和在共同生活环境中的人员；二是基于各国结核病流行趋势不同的特定人群。现存的发现结核病例的方式主要是被动的发现，即等着患者(如果经济条件和医疗条件允许)自己来寻求医疗救治。这种方式虽然能发现大量的患者，但寻求救治的患者一般已有了明显的症状，可能早就在家庭、群体之间发生了传播。大量没有寻医的患者对公众健康存在极大的隐患。

针对确诊的患者的亲属和与其密切接触的人员：一旦发现了结核患者，就应该要求其亲属和与其有密切接触的人员到医疗机构进行结核病筛查。同时，也需在条件允许的情况下主动去患者的家庭及其生活环境中进行筛查。