[发明专利]一种载EGCG的卵清蛋白纳米粒子的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种载EGCG的卵清蛋白纳米粒子的制备方法及其应用，其特征在于：利用加热自组装法制备纳米粒子，包括以下步骤：

（1）称取卵清蛋白（OVA）于50 mL的离心管中，然后加入pH 6.6的PBS缓冲液，涡旋充分溶解，水化过夜；

（2）将水化过夜的卵清蛋白溶液离心后收集上清液，除去不溶杂质；

（3）将步骤（2）中的所得的溶液在80℃的水浴中保持20 min；

（4）将步骤（3）的溶液水浴结束后，往溶液中立刻加入EGCG，此时溶液变成乳浊液；

（5）将步骤（4）得到的含EGCG的乳浊液进行涡旋30 s，然后立刻用流水冷却至室温；

（6）将步骤（5）得到的乳浊液立刻放入冰浴中，探头超声1 min;

（7）将步骤（6）得到的乳浊液低速离心后收集上清液；

（8）将步骤（7）得到的上清液再次进行离心后，弃去上清液，收集粒子；

（9）将步骤（8）收集的粒子重新悬浮在二次水，冷冻干燥后放入-20℃冰箱储存备用。

2.根据权利要求1所述的载EGCG的卵清蛋白纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中，OVA的质量为100 mg，水化过夜是在室温下进行，pH 6.6的PBS缓冲液为40 mL。

3.根据权利要求1所述的载EGCG的卵清蛋白纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述步骤（2） 中，离心速率为4000-6000 rpm，离心时间是10 min。

4.根据权利要求1所述的载EGCG的卵清蛋白纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述步骤（4）中，加入EGCG的浓度为1 mg/mL，体积为2 mL。

5.根据权利要求1所述的载EGCG的卵清蛋白纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述步骤（7）中，离心速率为6000-7000 rpm ，离心时间是10 min。

6.根据权利要求1所述的载EGCG的卵清蛋白纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述步骤（8）中，离心速率为12000-13000 rpm，离心时间为20 min。

7.根据权利要求1所述的载EGCG的卵清蛋白纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述步骤（9）中，冷冻干燥按照以下方法进行：在-80℃冷冻过夜后置于冻干机中冻干12～36 h。