[发明专利]一种应用KASP技术进行高通量转化体特异性检测的方法

权利要求书

1.一种应用KASP技术进行高通量转化体特异性检测的方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：(1)设计转化体靶标序列的引物及内源基因的引物，转化体靶标序列的引物设计时，一条引物设计在外源插入片段区域，另一条设计在插入片段侧翼的植物基因组区域，扩增片段的长度在50-120bp之间；内源基因的引物设计策略是：正向和反向引物都设计在作物的内源基因区域，扩增片段的长度在50-120bp之间；(2)提取样品的DNA；(3)利用转化体靶标序列的引物、内源基因的引物进行KASP检测；（4）若从某样品的产物中同时检测出FAM荧光和HEX荧光，则表明该样品含有相应的转化体成分；若从某样品仅检测到HEX荧光，没有检测到FAM荧光，则表明该样品不含有相应的转化体的成分；

步骤(1)中，转化体靶标序列的引物为引物组1-8中的一组或多组；内源基因的引物为引物组9-12中的一组或多组；

所述引物组1-8为：

所述引物组9-12为：

。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(3)具体包括，内源基因检测；转化体成分检测。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述KASP检测的反应体系为连接了标签序列的转化体靶标序列的引物和内源基因的引物、DNA模板以及KASP反应液。

4.一种转基因产品检测试剂盒，包括引物组1-8中的一组或多组，及引物组9-12中的一组或多组；

所述引物组1-8为：

所述引物组9-12为：

。

5.根据权利要求1-3中任意一种所述的方法或权利要求4中所述的检测试剂盒在对产品进行转基因检测中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述产品为玉米、油菜、水稻或大豆，通过KASP高通量地检测样品中是否含有转化体成分。