[发明专利]一种雌激素受体靶向肽及其制备和应用在审
申请号: | 201810043625.4 | 申请日: | 2018-01-17 |
公开(公告)号: | CN108358999A | 公开(公告)日: | 2018-08-03 |
发明(设计)人: | 陈礼明;张俊 | 申请(专利权)人: | 南京师范大学 |
主分类号: | C07K14/00 | 分类号: | C07K14/00;C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;A61K38/16;A61K47/42;A61P35/00 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 柏尚春 |
地址: | 210023 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 靶向肽 雌激素受体α 制备 氨基酸序列 雌激素受体 核苷酸序列 阳性乳腺癌 制备和应用 编码基因 应用 | ||
1.一种雌激素受体α靶向肽,其特征在于:所述靶向肽具有如SEQ ID No:1所示的氨基酸序列,其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No:4中的34~120所示。
2.根据权利要求1所述的雌激素受体α靶向肽,其特征在于:所述靶向肽还具有如SEQID No:2所示的氨基酸序列,其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No:4中的1~33所示。
3.权利要求2所述的雌激素受体α靶向肽,其特征在于:将SEQ ID No:4所示的核苷酸序列克隆到表达质粒的多克隆位点处,即所述靶向肽的氨基酸序列SEQ ID No:2与氨基酸序列SEQ ID No:1通过一个肽键直接连接。
4.权利要求1~2所述的雌激素受体α靶向肽的编码基因的表达载体,其特征在于:其包含所述的核苷酸序列SEQ ID No:4。
5.权利要求1~2所述的雌激素受体α靶向肽的编码基因的宿主细胞,其特征在于:其表达所述雌激素受体α靶向肽。
6.权利要求2所述的雌激素受体α靶向肽的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)第一结构域的质粒构建:合成第一结构域的两条单核苷酸链,其中,正向序列如SEQID No:5所示、反向序列如SEQ ID No:6所示,再与特异性BamHI和EcoRI双酶切的pET-22b载体进行连接反应,得到pET-22b-A载体;
(2)第二结构域的质粒构建:合成第二结构域的两条单核苷酸链,其中,正向序列如SEQID No:7所示、反向序列如SEQ ID No:8所示,再与步骤(1)中得到的特异性SalI和NotI双酶切的pET-22b-A载体进行连接反应,得到pET-22b-A-B载体;
(3)第三结构域的质粒构建:合成第三结构域的两条单核苷酸链,其中,正向序列如SEQID No:9所示、反向序列如SEQ ID No:10所示,再与步骤(2)中得到的特异性SalI和NotI双酶切的pET-22b-A-B载体进行连接反应,得到pET-22b-A-B-C质粒;
(4)将步骤(3)中得到的pET-22b-A-B-C质粒转入到感受态大肠杆菌DH5α,提取质粒并测序;
(5)将步骤(4)中测序正确的质粒转入感受态大肠杆菌DE3,进行蛋白表达并纯化,得到所述雌激素受体α靶向肽。
7.权利要求1~2中所述的雌激素受体α靶向肽在制备雌激素受体α阳性乳腺癌药物中的应用。
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