[发明专利]一种可抛式双酚A适配体生物传感器的制备方法

权利要求书

1.一种可抛式双酚A适配体的生物传感器的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

步骤一、清洗PET薄膜(1)，并在其上溅射一层纳米尺度的金膜(2)；所述金膜(2)采用高真空离子溅射仪溅射，溅射时间为80s-100s，溅射电流为20-30mA，溅射真空度不低于6×10^-3mbar，靶材距样品台的距离为9cm，溅射后的所述金膜(2)的厚度为16-20nm；

步骤二、将溅射好的所述PET薄膜(1)取出，裁剪成工作电极的尺寸；

步骤三、在所述金膜(2)上设置有透明胶带(3)，在所述透明胶带(3)上设置有圆形的通孔(4)，所述通孔(4)所在的区域为电极区，所述透明胶带(3)覆盖的区域为绝缘区，其余区域为导线区；

步骤四、对所述电极区的表面进行双酚A适配体修饰，得到双酚A适配体修饰的金纳米粒子电极：所述双酚A适配体的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示，将含有0.05μMTCEP的浓度为1μM的双酚A适配体溶液100μL滴涂在所述电极区的表面，放置于4℃的冰箱内12h，用去离子水冲洗所述电极区的表面，氮气吹干；

步骤五、采用MCH溶液对所述电极区的表面进行钝化：取100μL浓度为1mM的MCH滴涂于所述电极区的表面，在室温下静置2h后用去离子水冲洗，氮气吹干；

步骤六、形成适配体-MB复合物：将0.1mM的MB滴涂在所述电极区的表面，室温下静置2h，去离子水冲洗并氮气吹干，得到修饰后的工作电极。

2.根据权利要求1所述的可抛式双酚A适配体的生物传感器的制备方法，其特征在于：步骤一中所述PET薄膜(1)的清洗方法如下：先用无水乙醇超声清洗两次，去除表面的有机物，然后用离子水清洗两次，60℃烘箱烘干。

3.根据权利要求2所述的可抛式双酚A适配体的生物传感器的制备方法，其特征在于：步骤一中所述PET薄膜(1)长为4.8cm，宽为4cm，步骤二中所述工作电极的长为4cm，宽为1.2cm，所述透明胶带(3)的长为2.5cm，宽为1.2cm，所述通孔(4)的直径为10mm，所述通孔(4)的圆心距离所述PET薄膜(1)的前端之间的距离为7mm。

4.一种溶液中痕量双酚A的测定方法，其特征在于：包括如下步骤：

标准工作溶液的配制：配制不同浓度的双酚A标准溶液，浓度分别为0.1μg/L,1μg/L,10μg/L,100μg/L,500μg/L,700μg/L,1000μg/L；

采用权利要求1所述的方法制备得到的可抛式双酚A适配体的生物传感器进行测定，测定前，将不同浓度的双酚A标准溶液滴涂在所述电极区的表面，室温下反应30min，然后用去离子水充分冲洗，氮气吹干；

电化学检测及线性曲线：将所述可抛式双酚A适配体的生物传感器作为工作电极，以铂电极为对电极(6)，Ag/AgCl电极作为参比电极(5)，组成三电极体系，在pH值为7.0的0.5mM磷酸缓冲溶液中进行线性扫描伏安LSV测定，扫描速率为50mVs^-1，扫描范围为-0.4V—+0.2V。