[发明专利]一种可抛式双酚A适配体生物传感器的制备方法

说明书

本发明公开了一种可抛式双酚A适配体的生物传感器的制备方法，包括如下步骤：清洗PET薄膜(1)并在其上溅射一层纳米尺度的金膜(2)，裁剪成工作电极的尺寸，在所述金膜(2)上设置有透明胶带(3)，在所述透明胶带(3)上设置有圆形的通孔(4)，所述通孔(4)所在的区域为电极区，所述透明胶带(3)覆盖的区域为绝缘区，其余区域为导线区；对所述电极区的表面进行双酚A适配体修饰，得到双酚A适配体修饰的金纳米粒子电极，采用MCH溶液对所述电极区的表面进行钝化，采用亚甲基蓝(MB)滴涂在所述电极区的表面，得到修饰后的工作电极。本发明的可抛式双酚A适配体的生物传感器具有操作简单、分析速度快、成本低、适用于现场检测等优势。

技术领域

本发明涉及一种生物传感器，特别是涉及一种基于发卡状适配体和亚甲基蓝复合物的可抛式双酚A适配体的生物传感器的制备方法。

背景技术

双酚A(Bisphenol A，简称BPA)，化学名称为2,2-二(4-羟基苯基)丙烷，属于低毒性化学物质，作为一种十分重要的塑化剂材料，常用于玩具、奶瓶、饮水杯、食品包装材料等产品的生产中。其结构类似雄二醇和乙烯雌酚，因而具有和其他环境激素类似的效应，发挥拟雌激素作用，干扰生物体生殖、生长发育、神经系统、免疫系统等，甚至诱发癌症。世界各国都纷纷出台了相应的法律法规来禁止双酚A的应用。如2010年5月，法国国民议会议员投票一致赞成禁止对3岁以下儿童使用的食品容器使用双酚A的禁令。最新欧盟指令限制双酚A在玩具中的迁移量应小于0.04mg/L。因此，建立一种可以对痕量双酚A快速检测的简便方法具有重要的意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种结构简单、成本低、操作简便的可抛式双酚A适配体的生物传感器的制备方法。

一种可抛式双酚A适配体的生物传感器的制备方法，包括如下步骤：

步骤一、清洗PET薄膜，并在其上溅射一层纳米尺度的金膜；

步骤二、将溅射好的所述PET薄膜取出，裁剪成工作电极的尺寸；

步骤三、在所述金膜上设置有透明胶带，在所述透明胶带上设置有圆形的通孔，所述通孔所在的区域为电极区，所述透明胶带覆盖的区域为绝缘区，其余区域为导线区；

步骤四、对所述电极区的表面进行双酚A适配体修饰，得到双酚A适配体修饰的金纳米粒子电极；

步骤五、采用MCH溶液对所述电极区的表面进行钝化；

步骤六、采用MB滴涂在所述电极区的表面，对电极表面进行信号分子的组装，得到修饰后的工作电极。

本发明所述的可抛式双酚A适配体的生物传感器的制备方法，其中，所述金膜采用高真空离子溅射仪溅射，溅射时间为80s-100s，溅射电流为20-30mA，溅射真空度不低于6×10^-3mbar，靶材距样品台的距离为9cm，溅射后的所述金膜的厚度为16-20nm。

本发明所述的可抛式双酚A适配体的生物传感器的制备方法，其中，所述双酚A适配体的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示，步骤四具体包括如下方法：将含有0.05μMTCEP的浓度为1μM的双酚A适配体溶液100μL滴涂在所述电极区的表面，放置于4℃的冰箱内12h，用去离子水冲洗所述电极区的表面，氮气吹干。

本发明所述的可抛式双酚A适配体的生物传感器的制备方法，其中，步骤五具体包括如下步骤：取100μL浓度为1mM的MCH滴涂于所述电极区的表面，在室温下静置2h后用去离子水冲洗，氮气吹干。

本发明所述的可抛式双酚A适配体的生物传感器的制备方法，其中，步骤六具体包括如下步骤：将0.1mM的MB滴涂在所述电极区的表面，室温下静置2h，去离子水冲洗并氮气吹干，得到修饰后的工作电极。