[发明专利]一种用于治疗骨质疏松的多肽及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种用于治疗骨质疏松的多肽，其氨基酸序列为(Asp‑Ser‑Ser)6‑(D‑Tyr)‑Asn‑(D‑Trp)‑Asn‑Ser‑Phe‑(azaGly)‑Leu‑Arg(Me)‑Phe‑NH₂((AspSerSer)6‑Kp‑10，SEQ ID NO：1)；本发明还公开了上述多肽的制备方法，其包括多肽的合成、多肽的切割以及多肽粗品的分离纯化，本发明还涉及上述多肽在制备治疗骨质疏松的药物中的应用。本发明通过研究证明了敲除Gpr54或者Kiss1基因导致骨质疏松和破骨细胞过度活化，Kp‑10通过激活Gpr54抑制破骨细胞的分化，肌动蛋白环(actin‑ring)的形成以及骨吸收；(AspSerSer)6‑Kp‑10具有更好的骨靶向作用，在体内比Kp‑10更有效地治疗由于卵巢切除导致的骨质疏松，其为治疗破骨细胞相关疾病提供理论依据。

技术领域

本发明属于生物工程领域，涉及一种用于治疗骨质疏松的多肽及其应用。

背景技术

骨质疏松是最常见的骨相关疾病，也是发病率最高的疾病之一。据统计，50岁以后妇女骨质疏松的发病率约为50％，男性的发病率也高达20％，并且随着年龄的增长，发病率也随之上升。随着人口老龄化，我国骨质疏松症患者的数量已居世界首位，在过去的30年间，我国的骨质疏松症患者增加了300％。最新统计结果显示，我国骨质疏松患者达9000万，已成为严重的社会问题。破骨细胞的过度活化是造成骨质疏松的主要原因。妇女绝经之后，由于雌激素大量下降导致破骨细胞大量活化，破坏骨的微观结构，导致骨量不断下降，易发生骨折，这些都是骨质疏松疾病常见的症状。

破骨细胞是由造血系统中单核/巨噬细胞分化而来的，成骨细胞和间充质细胞分泌的细胞因子M‐CSF调控单核细胞的增殖、生存和向破骨细胞前体分化。成骨细胞和间充质细胞表达的破骨细胞活化因子RANKL与破骨细胞前体细胞表面受体RANK结合，决定单核破骨前体细胞最终向破骨细胞分化的命运。

Gpr54是G蛋白偶联受体中的视紫红质超家族一员。Gpr54的配体是Kissl基因表达的蛋白产物Kisspeptins(简称Kp)。Kiss1基因是在黑色素瘤中作为肿瘤抑制基因被发现，编码一个含145个氨基酸的蛋白，可被蛋白酶体切割，经剪切可生成由54个氨基酸组成的具有生物学活性的分泌肽，即kisspeptin-54，可进一步被酶切成kisspeptin-14，kisspeptin-13，Kisspeptin-10，都能与GPR54特异性结合而发挥生物学作用，是Gpr54的天然配体。其中Kisspeptin-10缩写Kp-10，是具有活性形式的最短的Kisspeptin，其是其中最小的生物活性肽，由10个氨基酸组成。通过基因敲除小鼠和临床病人遗传分析发现，Kiss1是Gpr54的天然配体，在下丘脑中高表达，多种物种中能调控黄体生成素(LH)的分泌，并且同样能调控GnRH的分泌，从而调控整个青春期的发生。

kiss1/Gpr54能调控青春期发育，而骨骼的生长正是青春期发育的最显著的特点之一。因此，kiss1/Gpr54受体完全有可能调控骨质的重建，从而影响到如骨质疏松等疾病。但是，迄今为止这方面还没有任何相关文献报道。

发明内容

发明人在针对kiss1/Gpr54受体参与调控骨质的重建的研究中，发现缺失G蛋白偶联受体54(Gpr54)导致破骨细胞活化，骨质疏松，其天然配体Kp-10通过抑制破骨细胞的形成和功能，具有抗骨质疏松作用，(AspSerSer)6-Kp-10能更好地将Kp-10靶向骨，产生骨保护作用。

本发明针对骨质疏松的治疗，提供了一种用于治疗骨质疏松的多肽Kp-10或(AspSerSer)6-Kp-10。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一个目的是提供一种多肽Kp-10在制备治疗骨质疏松的药物。