[发明专利]人体血清中地西泮与氯氮平检测的在线固相萃取分析方法及系统

说明书

人体血清中地西泮与氯氮平检测的在线固相萃取分析方法及系统。本发明的目的是提供一种在线固相萃取技术与高效液相色谱耦合法，可同时测定人体血清中地西泮与氯氮平两种药物浓度。通过方法学验证，表明该方法检测准确，检测速率快，提取回收率高，可重复性好。此外，本发明还提供了用于对人体血清中地西泮与氯氮平进行检测的在线固相萃取分析系统。

技术领域

本本发明公开了一种采用在线固相萃取与高效液相色谱联合应用技术，建立了同时测定人体血清中地西泮与氯氮平的分析方法，此外，本发明还提供了用于对人体血清中地西泮与氯氮平进行检测的在线固相萃取分析系统。

背景技术

地西泮为苯二氮卓类长效药物，具有抗焦虑、镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫及促进中枢性肌肉松弛作用；氯氮平为目前公认的治疗精神分裂症最有效的抗精神病药物，在临床上广泛用于失眠、抑郁症、癫痫等神经系统疾病的控制。地西泮与氯氮平合用，常用来治疗精神分裂症。但由于患者精神异常，易因过量服药导致中毒，危害患者的健康及生命安全，所以临床上对其进行血药浓度监控十分必要。经调研发现，目前国内尚未有采用高效液相色谱法同时测定地西泮与氯氮平两种药物的分析方法。

基于色谱技术的临床检验工作，其面临的首要挑战就是生物样本的制备。据统计，在生物样本分析工作中，80%左右的工作量及研究经费用于样本的前处理及分析样本的制备，以获得合格的、适用于现代分析仪器的检测样本。目前，生物样本的前处理方法一般常用：沉淀蛋白法、液液萃取法及固相萃取法。然而，沉淀蛋白法及液液萃取法均存在试剂用量大，而且样品损失率高的缺点。固相萃取法则存在成本消耗较高，样品洗脱不均一等问题。

因此，急需建立一种可同时测定人体血清中地西泮与氯氮平两种药物的分析方法；并开发一种节约成本、提高样品回收率的生物样品前处理的新分析系统。

发明内容

本发明的目的旨在克服现有技术缺陷，利用在线固相萃取技术与高效液相色谱联用方法，建立一种简便、快捷、可同时测定人体血清中地西泮与氯氮平的分析方法。本发明在提高检测效率的同时大大降低了血清中杂质对待测物的干扰，增加了色谱柱的使用寿命，改善了测定结果的准确度和重复性。

本发明的内容是通过以下技术方案来实现的：

一种人体血清中地西泮与氯氮平检测的在线固相萃取分析系统，该系统包括两部分，第一部分为：左泵、进样器、六通阀和固相萃取柱；第二部分为：右泵、分析柱和检测器；所述进样器在系统中串联于左泵的下游，所述检测器在系统中串联于分析柱的下游，所述六通阀用于切换该系统的两种工作状态；在第一种工作状态下，固相萃取柱在系统中串联于进样器的下游，分析柱在系统中串联于右泵的下游；在第二种工作状态下，固相萃取柱在系统中串联于右泵的下游，分析柱在系统中串联于固相萃取柱的下游。

一种人体血清中地西泮与氯氮平检测的在线固相萃取分析方法，所述方法包括将经过预处理的待测血清样品进行在线固相萃取技术进行处理，再经分析柱分离与紫外检测，获得相关药物的浓度，所述方法依次包括以下步骤：

采用乙酸乙酯萃取待测血清样品，随后进行氮吹，再用甲醇复溶，取上清液泵入在线固相萃取柱；

利用流动相A通过在线固相萃取柱进行杂质洗脱，将待测的地西泮与氯氮平保留于所述在线固相萃取柱上；

通过六通阀的切换，将所述在线固相萃取柱与分析柱在流路上进行串联，利用流动相B进行洗脱，将在线固相萃取柱上保留的地西泮与氯氮平转移到分析柱上进行成分分离；

采用分析色谱柱分离样品中的成分，流出液进入紫外检测器中进行分析。

3、如权利要求2中所述一种人体血清中地西泮与氯氮平检测的在线固相萃取分析的方法，其特征在于，所述步骤在样品进行氮气吹干过程中，采用40～60℃进行加热处理，促进溶剂的挥发。

进一步地，所述固相萃取柱采用Ph-1作为固定相；所述分析柱采用C18作为固定相。