[发明专利]芍药属油用植物油脂中酚类化合物的分析方法

说明书

本发明公开了一种芍药属油用植物油脂中酚类化合物的分析方法，采用HPLC‑Q‑TOF‑MS技术，通过自建酚类化合物数据库结合MassHunter QTOF/MS数据采集与定性软件对牡丹籽油和芍药籽油提取物中的酚类物质进行初步检索，检索到的化合物进一步进行二级质谱分析，根据碎片离子信息结合文献资料判断化合物的组成，然后根据化合物的结构特征选择合适的标品对得到的酚类物质进行定量分析，从而准确、快速的得到不同品种、不同产地的芍药属油用植物油脂中酚类化合物的组成，为进一步研究和开发提供参考和依据。

技术领域

本发明涉及天然化合物分析领域，特别涉及一种芍药属油用植物油脂中酚类化合物的分析方法。

背景技术

酚类化合物是一类广泛存在于植物体内的多酚类物质，是植物体内一种重要的次生代谢产物，其分子结构中含有若干个酚性羟基基团，根据结构特征主要分为酚酸类、黄酮类、单宁类、黄烷醇类以及苷类等。研究表明，植物酚类成分是一种天然抗氧化剂，能清除人体内的NO和ROS自由基，并且可对自由基诱发的生物大分子损伤起到保护作用；此外，它还能够抑制氧化酶活性，激活抗氧化酶体系，具有明显的抗氧化效果。

芍药属油用植物油脂中含有丰富的酚类化合物，具有较高的营养价值及药用价值。然而，芍药属植物油品种繁多，对其酚类化合物的组成研究尚处在起步阶段，未见相关报道。若能精确的分析芍药属植物油中酚类化合物的特征组分及其含量，对其加工资源综合开发利用具有重要的意义。

发明内容

本发明提供了一种芍药属油用植物油脂中酚类化合物的分析方法，通过精确的定性定量研究深入分析了芍药属油用植物油脂中酚类化合物的组成情况。

本发明的技术方案为：

一种芍药属油用植物油脂中酚类化合物的分析方法，包括以下步骤：

1)收集芍药属及相关植物中酚类化合物的名称、CAS号、化学式及相对分子质量信息，构建数据库；所述数据库包括酚酸类化合物、黄酮类化合物、单萜苷类化合物、酚苷类化合物以及茋类化合物；

2)从待分析芍药属油用植物油脂中提取酚类化合物，溶解于甲醇水溶液中制得提取液；

3)通过超高效液相色谱-质谱联用仪于负离子模式下得到所述提取液的总离子流色谱图，通过定性软件结合所述数据库检索得到提取液中含有的与数据库中精确分子量一致的目标色谱峰，然后利用Q-TOF-MS质谱分析器于负离子模式下选择目标色谱峰对应的分子离子进行二级质谱分析，根据碎片离子信息推断提取液所含的酚类化合物；其中

色谱条件为：色谱柱ZORBAX Eclipse Plus C18，柱温30℃，流动相A含0.1％体积分数甲酸的水溶液，流动相B含0.1％体积分数甲酸的乙腈，流速0.4mL/min，梯度洗脱程序：0-3min，流动相A95％-90％；3-4min，流动相A90％-80％；4-8min，流动相A 80％-45％；8-10min，流动相A 45％-10％；平衡时间3min，进样量2μL；质谱条件为：离子源ESI，离子采集范围100～1000m/z，毛细管电压4000V，碎片电压140V，干燥气9L/min高纯N₂，鞘气流速10L/min，喷雾气电压30psig；

4)将定性得到的酚类化合物进行分类归属，将具有每一类化合物母环结构的标准品配制成不同浓度梯度的对照品溶液，于上述色谱-质谱条件下，对系列梯度浓度对照品进行测定，以各个峰的色谱峰面积对分析物浓度作线性回归得到标准曲线，利用标准曲线对分类后的每一类化合物分别定量。