[发明专利]一种组织培养快速繁育方法

说明书

本发明属于猕猴桃种植技术领域，具体涉及一种组织培养快速繁育方法；一种组织培养快速繁育方法，包括如下步骤：S1、组培培养基的配制；S2、外植体的选取与灭菌；S3、诱导培养；S4、增殖培养；S5、生根培养；S6、炼苗移栽；利用组织培养的方法，对M310进行繁育，解决目前猕猴桃栽培中砧木繁育时间长、繁育速度慢等问题。

技术领域

本发明属于猕猴桃种植技术领域，具体涉及一种组织培养快速繁育方法。

背景技术

猕猴桃(Actinidia)为猕猴桃科(Actinidiaceae)猕猴桃属(ActinidiaLindl.)，雌雄异株大型落叶木质藤本植物，具有很高的营养价值和保健价值。而嫁接繁殖是目前猕猴桃栽培的主要繁殖方式，砧木不仅可以提高嫁接品种的抗性和适应性，还可以调节接穗品种的生长特性、开花结果习性、产量和果实品质等。随着猕猴桃产业的发展，随意采用砧木带来的不良后果逐渐显现，突出表现为嫁接不亲和、良种的优良性状退化、树体生长不良、果实品质劣变、商品率低、抗病力差。因此，选育优良砧木对接穗品种的早果、丰产、品质改善和抗性提高等有着重大的作用。

目前国内外猕猴桃栽培中，常用的砧木基本都是实生苗，由于实生苗繁育时间长，繁育速度慢，对一些抗性强的品种很难在短时间内扩大其规模；加上猕猴桃栽培中，溃疡病的快速蔓延，使得实生苗在生产中受周围环境的影响，也带有一定的病菌，从而导致嫁接的亲和性，为良种苗木的繁育造成了一定的影响。

发明内容

本发明提供一种组织培养快速繁育方法；利用组织培养的方法，对M310进行繁育，解决目前猕猴桃栽培中砧木繁育时间长、繁育速度慢等问题。

为解决上述的技术问题，本发明采用以下技术方案：

一种组织培养快速繁育方法，包括如下步骤：

S1、组培培养基的配制：配制基本培养基、诱导培养基、增殖培养基和生根培养基；

S2、外植体的选取与灭菌：取M310砧木茎段为外植体，经自来水冲洗1h，70％酒精消毒30-40s，无菌水冲洗3次，0.1％升汞水溶液灭菌3-6min或5％次氯酸钠水溶液灭菌10-15min后，无菌水冲洗5次，以滤纸吸去表面水分后，备用；

S3、诱导培养：将灭菌后外植体切成含单芽切段，接种到诱导培养基上，在温度25℃±2℃，光强2000lux±500lux,光照时间16h/d的无菌环境下，经30天培养至外植体萌发出幼嫩芽；

S4、增殖培养：将诱导培养出的幼嫩芽转接到增殖培养基上，每50天继代一次，增殖系数为3.10；

S5、生根培养：将继代增殖培养的幼嫩芽转接到生根培养基中，培养15-20天开始出现3-4条不定根，继续培养至根长1cm左右开始炼苗；

S6、炼苗移栽：刚移栽时容器选择穴盘并覆膜保湿，培养5-7天后撕掉保鲜膜，培养10天后移出人工气候箱，移入炼苗连栋温室，培养45天后换黑色营养钵栽植，苗木生长后期，需要定时施肥修剪进行壮苗。

进一步，基本培养基为MS或1/2MS培养基，其中，蔗糖或白糖25-35g/L，琼脂6.5-7g/L，pH5.0-6.2。

进一步，诱导培养基为MS+ZT 0.5-2mg/L+NAA 0.1-0.3mg/L。

进一步，增殖培养基为MS+ZT 2-3.5mg/L+NAA 0.1-0.3mg/L+GA3 0.5mg/L。

进一步，增殖培养基为MS+CPPU 2-3.5mg/L+NAA 0.1-0.3mg/L+GA30.5mg/L。

进一步，生根培养的培养基为1/2MS+IBA 0.3-0.7mg/L。

进一步，炼苗的基质为草炭和珍珠岩，草炭和珍珠岩的重量比为1-3:0-1。