[发明专利]一种提取发酵液中鼠李糖脂产物的方法

权利要求书

1.一种提取发酵液中鼠李糖脂产物的方法，所述方法包括以下步骤：

1)预处理：加热鼠李糖脂产生菌发酵液、冷却至室温后离心除去不溶物，得上清液；2)絮凝与浓缩：上清液中加入壳聚糖，搅拌混匀，自然沉降后，弃掉上层液相；3)洗脱：蒸馏水清洗去除沉淀物中残余发酵液后，加入NaHCO₃溶液，洗脱沉淀物中的鼠李糖脂，收集洗脱液；4)获取：调节洗脱液pH、静置沉淀、离心，获得鼠李糖脂产物。

2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1)的发酵液在80～100℃下，加热处理20～60min；在8,000g～10,000g条件下，离心除去菌体和变性蛋白等不溶物。

3.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中加入壳聚糖至终浓度为5～20g/L，在30～40℃下，絮凝沉降1～2h，然后弃掉上层液相。

4.按照权利要求1或3所述的方法，其特征在于：选择脱乙酰度≥90％的壳聚糖。

5.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3)中，对于每5-15克沉淀物，用20～50ml蒸馏水洗涤沉淀物，此洗涤过程共进行1-3次；用20～50ml浓度为1～5g/L的NaHCO₃水溶液重悬沉淀物，自然沉降，收集液体作为洗脱液，重复此过程共2-4次，收集洗脱液。

6.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤4)用浓度1-3mol/L的HCl水溶液调节洗脱液的pH至1.5～2.0；在4～10℃条件下，静置8～12h；在10,000g～12,000g条件下，离心获得鼠李糖脂产物。

7.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：

由鼠李糖脂产生菌，利用碳源为葡萄糖、或者蔗糖、或者甘油、或者糖蜜、或者大豆油中一种或二种以上的培养基，发酵得到的含鼠李糖脂的发酵液。

8.按照权利要求7所述的方法，其特征在于：将产鼠李糖脂菌种的种子液接种至含发酵培养基的培养体系中，生产鼠李糖脂表面活性剂；种子液与发酵培养基的体积比为2～6:100。

9.按照权利要求8所述的方法，其特征在于：所述的培养体系是三角瓶或发酵罐。

10.按照权利要求7或8所述的方法，其特征在于：发酵培养基按质量分数为：碳源2～5％，NaNO₃ 0.2～0.4％，KH₂PO₄ 0.1～0.3％，K₂HPO₄·3H₂O 0.1～0.3％，MgSO₄·7H₂O 0.02～0.06％，酵母粉0.05～0.15％，余量为水；pH 6.5～7.0。