[发明专利]一种测定钙防卫蛋白的试剂盒及其制备使用方法

权利要求书

1.一种测定钙防卫蛋白的试剂盒，其特征在于，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：

试剂R1：

试剂R2：

2.根据权利要求1所述的测定钙防卫蛋白的试剂盒，其特征在于，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：

试剂R1：

试剂R2：

3.根据权利要求1所述的测定钙防卫蛋白的试剂盒，其特征在于，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：

试剂R1：

试剂R2：

4.根据权利要求1-3任一项所述的测定钙防卫蛋白的试剂盒，其特征在于，所述试剂R1的pH值为7.5。

5.根据权利要求1-3任一项所述的测定钙防卫蛋白的试剂盒，其特征在于，所述试剂R2的pH值为7.5。

6.一种制备如权利要求1-5任一项所述的测定钙防卫蛋白的试剂盒的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)配制试剂R1

a.按照试剂R1的组分含量，将MES溶于纯化水中，搅拌均匀后，配置成R1缓冲液；

b.按照试剂R1的组分含量，将TWEEN 20溶于R1缓冲液中，搅拌均匀；再将PEG-8000和NaCl溶于其中，搅拌均匀并调节pH值，得试剂R1；

(2)配制试剂R2

a.按照试剂R2的组分含量，将MES溶于纯化水中，搅拌均匀后，配制成R2缓冲液；

b.按照试剂R2的组分含量，将EDC溶于R2缓冲液中，搅拌均匀；再将乳胶微球溶于R2缓冲液中，搅拌均匀后，室温放置12-18min；

c.按照试剂R2的组分含量，将钙防卫蛋白抗体溶于上述制得的溶液中，搅拌均匀后，室温放置5-8h；

d.按照试剂R2的组分含量，将BSA溶于上述制得的溶液中，搅拌均匀后，室温放置1-2h，调节pH值，得试剂R2。

7.一种使用如权利要求1-5任一项所述的测定钙防卫蛋白的试剂盒的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将待测样品与试剂R1混合，37℃孵育5min；

(2)加入试剂R2，混合均匀；

(3)采用全自动生化分析仪测定加入试剂R2后的混合液的吸光度A1；

(4)300s后，采用全自动生化分析仪再测定一次混合液的吸光度A2；

(5)根据吸光度变化值计算出样本中的钙防卫蛋白的浓度。

8.根据权利要求7所述的测定钙防卫蛋白的试剂盒的使用方法，其特征在于，所述步骤(1)和步骤(2)中，试剂R1和试剂R2按照体积比4:1混合。

9.根据权利要求7所述的测定钙防卫蛋白的试剂盒的使用方法，其特征在于，所述步骤(3)和步骤(4)中，在主波长580nm、副波长800nm处用全自动生化分析仪测定其吸光度。

10.根据权利要求7所述的测定钙防卫蛋白的试剂盒的使用方法，其特征在于，所述步骤(5)中，吸光度变化值为ΔA，即ΔA＝A2-A1。