[发明专利]一种测定钙防卫蛋白的试剂盒及其制备使用方法

说明书

本发明公开了一种测定钙防卫蛋白的试剂盒，涉及医学及生物化学技术领域，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，试剂R1包括：MES缓冲液、TWEEN 20、PEG‑8000、NaCl，溶剂为纯化水；试剂R2包括：MES缓冲液、EDC、乳胶微球、钙防卫蛋白抗体、BSA，溶剂为纯化水。本发明还公开了一种测定钙防卫蛋白的试剂盒的制备和使用方法。本发明相比现有技术的优点在于：采用本发明试剂盒测定钙防卫蛋白，操作方便、耗时短、精度高，有利于检测工作的大规模开展。

技术领域

本发明涉及医学及生物化学技术领域，尤其涉及一种适用于全自动生化分析的测定钙防卫蛋白的试剂盒及其制备使用方法。

背景技术

钙防卫蛋白是一种来源于中性粒细胞和巨噬细胞的含钙蛋白，其表达具有组织或细胞特异性，可作为急性炎性细胞活化的标志物。该蛋白于1980年由Fagerhol等首先从中性粒细胞中分离出来，并命名为L1蛋白质；1987年，Odink等报道该蛋白是与巨噬细胞移动抑制因子相关的蛋白(MRP)；同年，Dorin等报道是与囊性纤维化有关的抗原；1988年，Wilkinsoin等根据此种抗原特征又命名为钙粒蛋白；同年，Anderson等证实L1蛋白质、囊性纤维化抗原、MRP-8/14均为同一蛋白质；Dorin和Freemont等进一步证实这种蛋白质具有S-100蛋白的结构特征，后来将此种具有保护性、多功能、与钙结合的蛋白质命名为钙防卫蛋白。

钙防卫蛋白广泛分布在人体细胞、组织以及体液中，是粒细胞、单核细胞和角质细胞的主要蛋白质。嗜中性粒细胞钙防卫蛋白分布在溶酶体外的细胞液中，约占细胞总蛋白的5％，并为中性粒细胞更新的标志物，在许多炎症情况下升高，它可以在血浆、尿液、粪便、脑脊液、唾液、滑膜液以及结肠活检中被检测。

不同部位钙防卫蛋白的含量不同。其中，健康成人血浆钙防卫蛋白的含量为0.1-0.6mg/L，病毒感染者的含量为0.1-11.4mg/L，细菌感染者为0.6-11.0mg/L。在健康成人中，男性血浆钙防卫蛋白的含量又明显高于女性，而粪便钙防卫蛋白的含量则大约是血浆钙防卫蛋白含量的6倍并且无性别差异。

因此，钙防卫蛋白的精准检测对于临床的指导意义十分巨大。

目前，国内基本无钙防卫蛋白的检测试剂盒，国外也只有电酶联免疫法。然而，采用电酶联免疫法检测钙防卫蛋白的方式基本为手工操作，且检测时间达90min以上，不利于大规模开展。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种操作方便、耗时短、精度高的测定钙防卫蛋白的试剂盒及其制备使用方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：一种测定钙防卫蛋白的试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：

试剂R1：

其溶剂为纯化水；

试剂R2：

其溶剂为纯化水。

作为本发明的优选方式之一，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：

试剂R1：

其溶剂为纯化水；

试剂R2：

其溶剂为纯化水。

作为本发明的优选方式之一，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：

试剂R1：