[发明专利]一种水稻抗倒伏基因的SNP标记及其应用有效

专利信息
申请号: 201810060028.2 申请日: 2018-01-22
公开(公告)号: CN108048458B 公开(公告)日: 2020-11-13
发明(设计)人: 姚文元;彭佩;李文博;吴云天;郑秀婷 申请(专利权)人: 华智生物技术有限公司
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12Q1/6895;C12Q1/6858
代理公司: 北京市中联创和知识产权代理有限公司 11364 代理人: 谢威;康秀敏
地址: 410000 湖*** 国省代码: 湖南;43
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摘要:
搜索关键词: 一种 水稻 倒伏 基因 snp 标记 及其 应用
【权利要求书】:

1.一组应用于水稻抗倒伏基因SCM3检测的SNP分子标记的引物组,其特征在于:所述分子标记为K_030531、K_030532和K_030533,其中,K_030531的多态性碱基为C或T,K_030532的多态性碱基为T或C,K_030533的多态性碱基为C或G;

所述K_030531位于水稻参考基因组MSU7.0第3染色体上第28428063位碱基处;所述K_030532位于水稻参考基因组MSU7.0第3染色体上第28428410位碱基处;所述K_030533位于水稻参考基因组MSU7.0第3染色体上第28428721位碱基处;

用于检测所述SNP分子标记的引物组包括,

用于检测分子标记K_030531的引物组,

其特异性引物序列为:

Primer Seq Allele X:TCCTCTGAACCCTACTCGACA

Primer Seq Allele Y:CTCTGAACCCTACTCGACG

通用引物序列为:

TGTATGTTGATGTTGATGAGCT;

用于检测分子标记K_030532的引物组,

其特异性引物序列为:

Primer Seq Allele X:CTTTGCCTTGTATTCTCCTCC

Primer Seq Allele Y:CTTTGCCTTGTATTCTCCTCT

通用引物序列为:

TGGTCATCGATCAGTCATCA;

和用于检测分子标记K_030533的引物组,

其特异性引物序列为:

Primer Seq Allele X:AGGAGTAGAACACACACACAG

Primer Seq Allele Y:AGGAGTAGAACACACACACAC

通用引物序列为:

ACTCCACATGAGCCCATGCT。

2.根据权利要求1所述的分子标记的引物组,其特征在于:特异性引物分别连接不同的荧光接头序列。

3.根据权利要求2所述的分子标记的引物组,其特征在于:所述荧光接头序列为FAM或HEX荧光接头序列。

4.一种水稻抗倒伏基因SCM3的检测方法,检测方法包括如下步骤:

S1、提取水稻样品基因组DNA;

S2、以水稻基因组DNA为模板,采用如权利要求1所述的引物组对K_030531、K_030532、K_030533这三种SNP分子标记进行检测;

S3、若三组引物均只检测到引物Primer Y所对应的碱基,则判断水稻样品为纯和的SCM3基因型,表现为抗倒伏;若三组引物未同时检测到引物Primer Y所对应的碱基,则判断水稻样品为纯和的scm3基因型,表现为非抗倒伏;若三组引物同时检测到Primer X、PrimerY所对应的碱基,则判断水稻样品为杂和的SCM3基因型。

5.根据权利要求4所述的检测方法,其特征在于:S2中,利用如权利要求1所述的引物组进行KASP反应检测,其中,每组引物中不同特异性引物分别连接不同的荧光接头序列。

6.根据权利要求5所述的检测方法,其特征在于:特异性引物5’端连接FAM或HEX荧光接头序列。

7.权利要求1所述的引物组在水稻抗倒伏育种中的应用。

8.一种检测SCM3基因SNP分子标记的试剂盒,所述试剂盒包括如权利要求1所述的引物组。

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