[发明专利]一种水稻抗倒伏基因的SNP标记及其应用有效
申请号: | 201810060028.2 | 申请日: | 2018-01-22 |
公开(公告)号: | CN108048458B | 公开(公告)日: | 2020-11-13 |
发明(设计)人: | 姚文元;彭佩;李文博;吴云天;郑秀婷 | 申请(专利权)人: | 华智生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/6895;C12Q1/6858 |
代理公司: | 北京市中联创和知识产权代理有限公司 11364 | 代理人: | 谢威;康秀敏 |
地址: | 410000 湖*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 水稻 倒伏 基因 snp 标记 及其 应用 | ||
1.一组应用于水稻抗倒伏基因SCM3检测的SNP分子标记的引物组,其特征在于:所述分子标记为K_030531、K_030532和K_030533,其中,K_030531的多态性碱基为C或T,K_030532的多态性碱基为T或C,K_030533的多态性碱基为C或G;
所述K_030531位于水稻参考基因组MSU7.0第3染色体上第28428063位碱基处;所述K_030532位于水稻参考基因组MSU7.0第3染色体上第28428410位碱基处;所述K_030533位于水稻参考基因组MSU7.0第3染色体上第28428721位碱基处;
用于检测所述SNP分子标记的引物组包括,
用于检测分子标记K_030531的引物组,
其特异性引物序列为:
Primer Seq Allele X:TCCTCTGAACCCTACTCGACA
Primer Seq Allele Y:CTCTGAACCCTACTCGACG
通用引物序列为:
TGTATGTTGATGTTGATGAGCT;
用于检测分子标记K_030532的引物组,
其特异性引物序列为:
Primer Seq Allele X:CTTTGCCTTGTATTCTCCTCC
Primer Seq Allele Y:CTTTGCCTTGTATTCTCCTCT
通用引物序列为:
TGGTCATCGATCAGTCATCA;
和用于检测分子标记K_030533的引物组,
其特异性引物序列为:
Primer Seq Allele X:AGGAGTAGAACACACACACAG
Primer Seq Allele Y:AGGAGTAGAACACACACACAC
通用引物序列为:
ACTCCACATGAGCCCATGCT。
2.根据权利要求1所述的分子标记的引物组,其特征在于:特异性引物分别连接不同的荧光接头序列。
3.根据权利要求2所述的分子标记的引物组,其特征在于:所述荧光接头序列为FAM或HEX荧光接头序列。
4.一种水稻抗倒伏基因SCM3的检测方法,检测方法包括如下步骤:
S1、提取水稻样品基因组DNA;
S2、以水稻基因组DNA为模板,采用如权利要求1所述的引物组对K_030531、K_030532、K_030533这三种SNP分子标记进行检测;
S3、若三组引物均只检测到引物Primer Y所对应的碱基,则判断水稻样品为纯和的SCM3基因型,表现为抗倒伏;若三组引物未同时检测到引物Primer Y所对应的碱基,则判断水稻样品为纯和的scm3基因型,表现为非抗倒伏;若三组引物同时检测到Primer X、PrimerY所对应的碱基,则判断水稻样品为杂和的SCM3基因型。
5.根据权利要求4所述的检测方法,其特征在于:S2中,利用如权利要求1所述的引物组进行KASP反应检测,其中,每组引物中不同特异性引物分别连接不同的荧光接头序列。
6.根据权利要求5所述的检测方法,其特征在于:特异性引物5’端连接FAM或HEX荧光接头序列。
7.权利要求1所述的引物组在水稻抗倒伏育种中的应用。
8.一种检测SCM3基因SNP分子标记的试剂盒,所述试剂盒包括如权利要求1所述的引物组。
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