[发明专利]一种鹿瓜多肽的制备方法及鹿瓜多肽在制备特殊医学用途食品中的应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种鹿瓜多肽的制备方法及鹿瓜多肽在制备特殊医学用途食品中的应用。本发明提供的鹿瓜多肽，以复合蛋白酶对提取液进行酶解，以硫酸钙去除鞣质及生物碱，避免了致敏物质的产生，同时也提高了产品的稳定性，将本发明提供的多肽制成粉，可以通过口服方式给药，提高了给药的便利性。实验表明，本发明提供的鹿瓜多肽能够有效降低模型鼠关节液中的IL‑1β、TNF‑α含量，与对照组呈现显著性差异，p0.05。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种鹿瓜多肽的制备方法及鹿瓜多肽在制备特殊医学用途食品中的应用。

背景技术

鹿瓜多肽是鹿科动物梅花鹿(Cervus Nippon Temmick)的骨骼和葫芦科植物甜瓜(Cucumis melo L.)的干燥成熟种子，经分别提取后制成的产品，其富含的多种游离氨基酸，为骨细胞合成BMPs、TGF-β，FGF等骨源性生物因子提供原料，促进骨源性生物因子的合成。有机钙、磷离子可参与钙磷代谢，维持骨容量。临床上，鹿瓜多肽是一种适用于风湿、类风湿性关节炎、骨折的早期愈合、骨关节炎、腰腿疼痛及创伤恢复等的注射液，为淡黄色澄明液体。

然而，由于鹿瓜多肽提取物中常含有生物碱和鞣质。鞣质、生物碱与蛋白质能够发生反应生成不溶于水且不易被消化吸收的沉淀，鞣质与生物碱也能结合形成不溶于水且不易被消化吸收的沉淀，造成过敏反应及多肽功能的丧失。目前，临床中已经获得多例因使用鹿瓜多肽注射液时出现的过敏反应病例。

如何在兼顾鹿瓜多肽功效的同时，提高产品的稳定性、降低过敏反应的发生率仍在不断的研究中。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种鹿瓜多肽的制备方法及鹿瓜多肽在制备特殊医学用途食品中的应用，本发明提供的鹿瓜多肽稳定性高，过敏反应的发生率低，且疗效得到提高。

本发明提供的鹿瓜多肽的制备方法包括：

步骤1：鹿骨粉碎后以水于80℃～110℃、0.05MPa～0.5MPa提取3～5次；提取液经澄清后，上清液与复合蛋白酶混合，于50℃、pH值为5.5～7.5，1000转/min～1500转/min的条件下进行搅拌反应1h～2h；加热灭酶后，分离上清液，依次通过6kDa、3kDa滤膜，得到鹿骨多肽提取液；

步骤2：甜瓜籽以水后于80℃～110℃、0.05MPa～0.5MPa提取3～5次；提取液经澄清后，上清液与复合蛋白酶混合，于50℃、pH值为5.5～7.5，1000转/min～1500转/min的条件下进行搅拌反应1h～2h；加热灭酶后，分离上清液，依次通过6kDa、3kDa滤膜，得到甜瓜籽多肽提取液；

步骤3：按照鹿骨多肽：甜瓜籽多肽＝(3～5):1的质量比，将鹿骨多肽提取液与甜瓜籽多肽提取液混合，在混合液中加入乳酸钙至其质量分数为3％～5％，制得含有鹿瓜多肽的溶液。

一些实施例中，鹿骨粉碎后以水于85℃、0.1MPa～0.3MPa的条件下提取3～5次。

另一些实施例中，鹿骨粉碎后以水于95℃、0.15MPa～0.4MPa的条件下提取3～5次。

另一些实施例中，鹿骨粉碎后以水于105℃、0.35MPa～0.5MPa的条件下提取3～5次。

本发明实施例中，所述鹿骨与水的质量比为1:2，所述提取的pH值为6～7，鹿骨的粒度为60目。

本发明实施例中，步骤1中所述澄清包括：

步骤①：调节pH值为3.5～5.5，3℃～8℃静置15h～20h后，经50微米孔径陶瓷膜过滤，滤液用1500～2000转/min离心机离心20min，取上清液；