[发明专利]一种双酶法控制环糊精包合物缓释的方法

权利要求书

1.一种双酶法控制环糊精包合物缓释的方法，其特征在于步骤如下：

（1）混合溶液的制备：将环糊精和客体分子按照比例进行包合，制备得到环糊精包合物混合溶液；

（2）环糊精包合物的制备：将步骤（1）得到的混合溶液在真空条件下进行冷冻干燥，然后利用水或有机试剂对环糊精包合物混合物进行洗涤；对洗涤后所得溶液进行过滤，除去滤液，得到滤渣；将滤渣在真空干燥箱中烘干，制得环糊精包合物；

（3）反应底物溶液的制备：将步骤（2）所得环糊精包合物溶于磷酸盐缓冲溶液中，得到环糊精包合物质量浓度为0.05%-2%的反应底物溶液；

（4）双酶反应：在步骤（3）所得反应底物溶液加入环糊精糖基转移酶和糖化酶进行反应，使得客体分子均匀的、速度可控的、彻底释放。

2.根据权利要求1所述双酶法控制环糊精包合物缓释的方法，其特征在于：所述环糊精包括α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精、葡萄糖基-α-环糊精、葡萄糖基-β-环糊精、葡萄糖基-γ-环糊精、麦芽糖基-α-环糊精、麦芽糖基-β-环糊精、麦芽糖基-γ-环糊精、麦芽三糖基-α-环糊精、麦芽三糖基-β-环糊精或麦芽三糖基-γ-环糊精中的一种。

3.根据权利要求1所述双酶法控制环糊精包合物缓释的方法，其特征在于：所述客体分子主要包括水不溶的客体分子、不稳定的客体分子、易挥发的客体分子及生物活性不稳定的客体分子。

4.根据权利要求3所述双酶法控制环糊精包合物缓释的方法，其特征在于：所述客体分子具体为苯甲酸钠、香兰素、苏合香、β-胡萝卜素、姜黄素、番茄红素、布洛芬、克拉霉素、维生素A、维生素E、丙酸乙酯、戊酸、香芹酚、银杏酮酯、丁香油、玫瑰精油、β-紫罗兰酮、肉桂油、肉桂酸醛、桂利嗪、穿心莲内酯、苯海索、石墨烯、吲哚美辛、诺氟沙星、大蒜精油、水杨酸、人参皂苷、血红素、柔红霉素、亮绿、尼泊金乙酯、紫杉醇、丹皮酚、维胺酯、栀子黄色素、艾叶挥发油、腺苷、鱼腥草挥发油、氟苯尼考、替米考星、甲苯磺丁脲、双氯芬酸钠、阿司匹林、水飞蓟素、薄荷醇、薄荷油、人工麝香、葛根素、黄连素、青蒿油或黄酮类物质。

5.根据权利要求1所述双酶法控制环糊精包合物缓释的方法，其特征在于步骤（1）具体如下：将环糊精与客体分子按照包合比为1:1-100进行包合，具体为在室温条件下搅拌10-24h，通过饱和溶液法制备得到环糊精包合物混合溶液。

6.根据权利要求1所述双酶法控制环糊精包合物缓释的方法，其特征在于步骤（2）具体如下：将步骤（1）得到的混合溶液在-50℃、10-30Pa真空下进行冷冻干燥24-48h，然后利用水或有机试剂对环糊精包合物混合物进行洗涤1-3次；对洗涤后所得溶液进行过滤，得到滤渣，将滤渣在25-55℃、10-50Pa的真空干燥箱中进行干燥6-24h，得到环糊精包合物。

7.根据权利要求1所述双酶法控制环糊精包合物缓释的方法，其特征在于步骤（2）中所述有机试剂为无水乙醇、正己烷、甲醇或乙醚中的一种。

8.根据权利要求1所述双酶法控制环糊精包合物缓释的方法，其特征在于步骤（3）具体如下：将步骤（2）所得环糊精包合物溶于pH为4.0-8.0、浓度为10 mM-200 mM的磷酸盐缓冲液中，得到质量浓度为0.05%-2%的反应底物溶液。

9.根据权利要求1所述双酶法控制环糊精包合物缓释的方法，其特征在于步骤（4）具体如下：取步骤（3）所得反应底物溶液900μL于离心管中，加入1-500μL 环糊精糖基转移酶CGTase和1-500μL糖化酶，置于30-60℃反应0.5-48h，使得双酶法控制环糊精包合物进行缓释。