[发明专利]自多潜能干细胞有效诱导定形内胚层在审
| 申请号： | 201810066827.0 | 申请日： | 2012-06-21 |
| 公开（公告）号： | CN108220224A | 公开（公告）日： | 2018-06-29 |
| 发明（设计）人： | N.富纳;K.赫斯;J.伊克伯格;H.塞姆布 | 申请（专利权）人： | 诺沃—诺迪斯克有限公司;宝生物工程欧洲股份公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12N5/0735;C12N5/074 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 黄希贵 |
| 地址： | 丹麦*** | 国省代码： | 丹麦;DK |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 多潜能干细胞 定形内胚层 原条细胞 诱导 分化 成熟 | ||
1. 用于使干细胞分化为定形内胚层的方法，包括以下步骤：
c. 在包含至少2 µM CHIR的培养基中孵育干细胞的第一起始步骤，其中在所述起始步骤期间激活素A不存在；和
d. 在包含激活素A的培养基中孵育干细胞的第二后续步骤。
2.权利要求1的方法，其中所述培养基是RPMI-1640。
3.权利要求1或2的方法，其中所述干细胞是胚胎干细胞或诱导的多潜能干细胞。
4. 前述权利要求中任一项的方法，其中CHIR的浓度为至少大约2.5 µM，或至少大约3.1 µM，例如范围在大约2.5-15µM，例如范围在大约3.1-15 µM，或例如范围在大约3.1-7 µM，或例如范围在大约3.5-7 µM，或例如范围在大约3.5-6 µM，或例如大约3.5-5 µM。
5. 前述权利要求中任一项的方法，其中CHIR的浓度为至少大约3.1 µM。
6. 前述权利要求中任一项的方法，其中CHIR的浓度为至少大约3.5 µM。
7.前述权利要求中任一项的方法，其中所述与CHIR的孵育为至少24小时。
8.前述权利要求中任一项的方法，其中所述与激活素A的孵育为至少24小时。
9.前述权利要求中任一项的方法，其中所述与激活素A的孵育为48至72小时。
10.前述权利要求中任一项的方法，其中内胚层细胞得自所述定形内胚层细胞。
11.权利要求10的方法，其中所述内胚层细胞是胰内胚层细胞。
12.通过权利要求1-11的方法可获取的胰内胚层细胞。
13. 在培养基中以下CHIR浓度的CHIR的用途：至少2 µM，至少3 µM，例如范围在大约2-15 µM，例如大约3-15 µM，例如大约3.1-15 µM，或例如大约3.1-7 µM，或例如大约3.5-15uM，或例如大约3.5-7 µM。
14. 在培养基中浓度为至少2 µM的CHIR在自胚胎干细胞诱导原条细胞中的用途。
15. 浓度范围为3.5-7 µM的CHIR在自胚胎干细胞诱导定形内胚层细胞中的用途。
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