[发明专利]靶向CSF1R嵌合抗原受体修饰的NK92MI细胞和T细胞及其制法和应用

权利要求书

1.一种嵌合抗原受体CAR，其特征在于，所述嵌合抗原受体CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域特异性结合于CSF1R抗原，

所述的CAR的结构如式I所示：

L-scFv-Z-TM-C-CD3ζ (I)

式中，

各“-”独立地为连接肽或肽键；

L为任选的信号肽序列；

scFv为靶向CSF1R的抗体单链可变区序列；和

Z为无或Fc序列；

TM为跨膜结构域；

C为共刺激信号分子；

CD3ζ为源于CD3ζ的胞浆信号传导序列；

所述的scFv的结构如式A3所示：

V_H2-V_L2 (A3)；

其中，V_L2为抗CSF1R抗体的轻链可变区；V_H2为抗CSF1R抗体的重链可变区；“-”为连接肽(或柔性接头)或肽键；

V_L2的氨基酸序列如SEQ ID NO.:2的第159-264位所示，且V_H2的氨基酸序列如SEQ IDNO.:2的第23-138位所示。

2.如权利要求1所述的嵌合抗原受体CAR，其特征在于，所述CAR的氨基酸序列如SEQ IDNO.:2所示。

3.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的嵌合抗原受体(CAR)。

4.一种载体，其特征在于，所述的载体含有权利要求3所述的核酸分子。

5.一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞含有权利要求4所述的载体或染色体中整合有外源的权利要求3所述的核酸分子或表达权利要求1所述的CAR。

6.一种制备工程化免疫细胞的方法，其特征在于，所述的工程化免疫细胞表达权利要求1所述的CAR，包括以下步骤：将权利要求3所述的核酸分子或权利要求4所述的载体转导入T细胞或NK细胞内，从而获得所述工程化免疫细胞。

7.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物含有权利要求1所述的嵌合抗原受体、权利要求3所述的核酸分子、权利要求4所述的载体、或权利要求5所述的细胞，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

8.一种如权利要求1所述的嵌合抗原受体、权利要求3所述的核酸分子、权利要求4所述的载体、或权利要求5所述的细胞的用途，其特征在于，用于制备杀伤肿瘤微环境的M2型肿瘤相关的巨噬细胞的药物或制剂。

9.一种用于制备权利要求5所述细胞的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有容器，以及位于容器内的权利要求3所述的核酸分子、或权利要求4所述的载体。

10.一种权利要求5所述细胞、或权利要求7所述的药物组合物的用途，其特征在于，用于制备一药物，所述药物用于杀伤肿瘤微环境的M2型肿瘤相关的巨噬细胞。