[发明专利]靶向CSF1R嵌合抗原受体修饰的NK92MI细胞和T细胞及其制法和应用

说明书

本发明涉及一种靶向CSF1R嵌合抗原受体修饰的NK92MI细胞和T细胞及其制法和应用，具体地，本发明提供了一种嵌合抗原受体CAR，所述嵌合抗原受体CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域结合CSF1R抗原。本发明的融合蛋白可杀伤肿瘤微环境的M2型肿瘤相关的巨噬细胞，从而破坏肿瘤(尤其是实体瘤)微环境，并且可与其他治疗癌症或肿瘤的药物联用，用来治疗癌症或肿瘤。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体地说，本发明涉及一种靶向CSF1R嵌合抗原受体修饰的NK92MI细胞和T细胞及其制法和应用。

背景技术

癌症一直是危害人类健康的重大疾病，在过去的几十年里，癌症的发病率和死亡率一直在不断的增加。近年来，作为肿瘤的治疗策略之一的肿瘤免疫治疗在临床上取得了重大的进展。但是，无论是内源性T细胞还是外源性T细胞都会受到肿瘤微环境的抑制，肿瘤微环境由于其免疫抑制特性，导致新一代免疫治疗技术应用于实体瘤时遇到归巢、免疫耐受等多重障碍。肿瘤相关巨噬细胞是肿瘤微环境中的一个重要组成部分，在肿瘤的发生发展中扮演着关键而复杂的作用。它们通过分泌促肿瘤新生血管生成因子和生长因子来促进肿瘤的发展，同时还能释放免疫抑制性的细胞因子来抑制T细胞的功能与代谢。巨噬细胞分为M1型和M2型，肿瘤细胞能够将巨噬细胞募集并塑造成M2型巨噬细胞。相关研究表明，M2型肿瘤相关巨噬细胞的遍布已经与不良的预后联系起来。

近年来，以免疫检验点抗体药物(例如PD-1和PD-L1抗体药物)和嵌合体抗原受体修饰的T细胞(CAR-T细胞)为代表的新一代治疗技术和药物，在临床上取得了重大进展^1-4。例如，靶向CD19分子的CAR-T细胞治疗技术在难治、复发的急性淋巴细胞白血病上，可以达到90％以上的完全缓解率⁵。但是，无论是内源性T细胞还是外源性T细胞都会受到肿瘤微环境的抑制，肿瘤微环境由于其免疫抑制特性，导致新一代免疫治疗技术应用于实体瘤时遇到归巢、免疫耐受等多重障碍⁴。在肿瘤免疫微环境中，存在着多种抑制信号可以抑制效应T细胞的作用。

因此，本领域迫切需要开发特异性针对实体瘤的、有效的、疗效稳定、副作用小的，并且能够打破M2型肿瘤相关的巨噬细胞在肿瘤微环境中的抑制作用的工程化免疫细胞。

发明内容

本发明的目的是提供一种特异性针对实体瘤的、有效的、疗效稳定、副作用小的，并且能够打破M2型肿瘤相关的巨噬细胞在肿瘤微环境中的抑制作用的工程化免疫细胞。

本发明第一方面提供了一种嵌合抗原受体CAR，其特征在于，所述嵌合抗原受体CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域特异性结合于CSF1R抗原。

在另一优选例中，所述的CAR的结构如式I所示：

L-scFv-Z-TM-C-CD3ζ (I)

式中，

各“-”独立地为连接肽或肽键；

L为任选的信号肽序列；

scFv为靶向CSF1R的抗体单链可变区序列；和

Z为无或Fc序列；

TM为跨膜结构域；

C为共刺激信号分子；

CD3ζ为源于CD3ζ的胞浆信号传导序列。

在另一优选例中，所述的scFv的结构如式A2或A3所示：

V_L1-V_H1 (A2)；或

V_L2-V_H2 (A3)；