[发明专利]猪α肠道冠状病毒及其培养方法和应用有效

专利信息
申请号: 201810070004.5 申请日: 2018-01-24
公开(公告)号: CN108384762B 公开(公告)日: 2021-07-30
发明(设计)人: 田小艳;李春梅;潘永飞;王东东;欧阳海平;宋延华 申请(专利权)人: 温氏食品集团股份有限公司
主分类号: C12N7/00 分类号: C12N7/00;G01N33/569;C12Q1/70;C12Q1/6869;A61K39/215;A61P31/14
代理公司: 广州容大知识产权代理事务所(普通合伙) 44326 代理人: 刘新年
地址: 527400 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 肠道 冠状病毒 及其 培养 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种猪α肠道冠状病毒(Swine enteric alphacoronavirus),其特征在于:保藏号:CCTCC NO:V201801,所述猪α肠道冠状病毒核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示;所述猪α肠道冠状病毒的分离培养方法,包括步骤:

(1)病料采集与处理;

(2)将(1)中所得到病料进行传代培养,采用的细胞系为Vero细胞,维持液为含胰蛋白酶的维持液。

2.根据权利要求1所述的猪α肠道冠状病毒,其特征在于,所述步骤(2)传代培养操作方法包括:将病料直接接种于经含胰蛋白酶的DMEM洗过的Vero细胞;在37℃的5% CO2条件下于含胰蛋白酶的吸附液中吸附;然后再于含胰蛋白酶的维持液中培养;重复上述操作进行传代培养。

3.根据权利要求1或2所述的猪α肠道冠状病毒,其特征在于,所述步骤(2)中胰蛋白酶的终浓度为6μg/mL。

4.根据权利要求1或2所述的猪α肠道冠状病毒,其特征在于,所述步骤(2)传代培养时,每次传代前,将上一代的细胞培养物反复冻融3次。

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