[发明专利]白葡萄球菌粉的加工及质量检测方法在审
申请号: | 201810072107.5 | 申请日: | 2018-01-25 |
公开(公告)号: | CN108018249A | 公开(公告)日: | 2018-05-11 |
发明(设计)人: | 林祥宇;李宁;聂昌盛 | 申请(专利权)人: | 仁和堂药业有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/44 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 276600 山东省临沂市莒南*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 葡萄球菌 加工 质量 检测 方法 | ||
1.白葡萄球菌粉的加工及质量检测方法,其包括如下步骤:步骤1)制备白葡萄球菌种子液,步骤2)制备白葡萄球菌发酵液,步骤3)制备白葡萄球菌粉,步骤4)质量检测。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
步骤1)制备白葡萄球菌种子液:取白葡萄球菌液按照3-5%的接种量接种到种子培养基中,30℃、100rpm摇床培养24h,获得种子液;
步骤2)制备白葡萄球菌发酵液:将种子液按照3-5%的接种量接种于装有麦麸培养基的发酵罐中进行发酵培养,培养温度30℃,发酵培养48h,得白葡萄球菌发酵液;
步骤3)制备白葡萄球菌粉:往白葡萄球菌发酵液中添加甲醛,控制终浓度为0.5wt%,25℃灭活48h,再通过高速碟片机以5000rpm的速度离心8min,收集菌体沉淀,真空冷冻干燥,得到白葡萄球菌粉;
步骤4)质量检测:通过检测白葡萄球菌粉的外观、干燥失重、灼热残渣、重金属含量、杂菌、含磷量来确定白葡萄球菌粉的质量。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述麦麸培养基按照如下工艺制备而得:
(1)将麦麸研磨粉碎,过50目筛,然后以1:15的料水质量比混合,再加入中性淀粉酶,在70℃温度条件下处理15min,然后离心,收集沉淀和上层液体,将上层液体置于90℃的条件下,保温10min灭酶,冷却至室温,得到组分A;
(2)将沉淀加入到4-5倍重量的浓度为3-4M的盐酸,采用超声处理10min,超声波强度为25kHz,然后升温至80℃,保温条件下搅拌水解7-9小时,搅拌速度为100rpm,过滤收集滤液,然后用氨水中和残余盐酸,调整溶液pH为7.5,得到组分B;
(3)将组分A和组分B混匀得到麦麸培养基。
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述种子培养基的组分为:葡萄糖12g/L,琼脂7g/L,蛋白胨3g/L,KH
5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤1)中,白葡萄球菌液的浓度为(3-5)×10
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述中性蛋白酶按照每g麦麸添加0.6U的量进行添加。
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