[发明专利]白葡萄球菌粉的加工及质量检测方法在审

专利信息
申请号: 201810072107.5 申请日: 2018-01-25
公开(公告)号: CN108018249A 公开(公告)日: 2018-05-11
发明(设计)人: 林祥宇;李宁;聂昌盛 申请(专利权)人: 仁和堂药业有限公司
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12R1/44
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 276600 山东省临沂市莒南*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 葡萄球菌 加工 质量 检测 方法
【说明书】:

发明属于药物技术领域,公开了白葡萄球菌粉的加工及质量检测方法,其包括如下步骤:步骤1)制备白葡萄球菌种子液,步骤2)制备白葡萄球菌发酵液,步骤3)制备白葡萄球菌粉,步骤4)质量检测。本发明白葡萄球菌粉的加工成本低,产品质量符合标准。

技术领域

本发明属于药物技术领域,具体涉及白葡萄球菌粉的加工及质量检测方法。

背景技术

白葡萄球菌粉为一种非致病性的口服细菌制剂,系由非致病性白葡萄球菌液体培养而得的灭活干燥菌体制成。实验表明,其具有近似可待因的镇咳强度,直接作用于延脑咳嗽中枢,对急性咳嗽镇咳作用明显,剂量越大,镇咳作用越强,并有调节自主神经系统功能,能使痰量明显减少。发酵法制备获得白葡萄球菌粉是制药企业生产白葡萄球菌粉的唯一途径,但是培养基的成本制约着企业的发展,目前较多企业采用葡萄糖蛋白胨培养基,原料成本高,菌体密度低,企业的利润大大降低。“用液体发酵法生产气管炎菌苗片的最佳工艺条件研究,山东医药工业1999年”,公开了一种白葡萄球菌培养基,包括蛋白胨0.5%,尿素适量,玉米浆1%,葡萄糖1%,柠檬酸钠0.3%,硫酸镁0.05%以及氯化钠0.5%,该培养基消耗大量蛋白胨以及葡萄糖,成本较高,并且获得的菌体浓度仅达到109CFU/mL级别。需要改进之处在于,如何提高菌体浓度,并且降低培养成本。

小麦麸皮(麦麸)是面粉加工的主要副产品,过去,麸皮主要是用作动物饲料,经济价值不高,也有很多厂家将小麦麦麸随意丢弃。小麦麸皮含有丰富的碳水化合物、蛋白质、维生素E、酚类化合物以及无机矿物质等(麦麸的功能成分及应用研究进展,贾天广,食品研究与开发2014年),已经逐渐应用到其他领域,包括保健品、食品添加剂、提取膳食纤维和膳食蛋白等,具备广泛的应用前景和开发价值。但由于小麦麸皮成分复杂,其处理工艺难以掌握。细菌培养领域可采用部分麦麸作为补充物,但是现有技术中大多仅限于对小麦麸皮进行简单处理,作为细菌培养基碳源的部分补充物,用于降低培养基的成本;迄今还没有出现以小麦麸皮为主要原料的白葡萄球菌培养基。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术白葡萄球菌加工工艺成本高以及菌体产量低的缺陷,提供了白葡萄球菌粉的加工及质量检测方法。

本发明是通过如下技术方案来实现的:

白葡萄球菌粉的加工及质量检测方法,其包括如下步骤:步骤1)制备白葡萄球菌种子液,步骤2)制备白葡萄球菌发酵液,步骤3)制备白葡萄球菌粉,步骤4)质量检测。

进一步地,

所述方法包括如下步骤:

步骤1)制备白葡萄球菌种子液:取白葡萄球菌液按照3-5%的接种量接种到种子培养基中,30℃、100rpm摇床培养24h,获得种子液;

步骤2)制备白葡萄球菌发酵液:将种子液按照3-5%的接种量接种于装有100L麦麸培养基的发酵罐中进行发酵培养,培养温度30℃,通气量保持溶氧水平为20%,并通过添加葡萄糖控制含糖量不低于0.2wt%,发酵培养48h,得白葡萄球菌发酵液;

步骤3)制备白葡萄球菌粉:往白葡萄球菌发酵液中添加甲醛,控制终浓度为0.5wt%,25℃灭活48h,再通过高速碟片机以5000rpm的速度离心8min,收集菌体沉淀,真空冷冻干燥,得到白葡萄球菌粉;

步骤4)质量检测:通过检测白葡萄球菌粉的外观、干燥失重、灼热残渣、重金属含量、杂菌、含磷量来确定白葡萄球菌粉的质量。

具体地,所述麦麸培养基按照如下工艺制备而得:

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