[发明专利]一种甘松活性成分的定量检测方法及甘松活性成分与应用

说明书

本发明提供了一种甘松活性成分的定量检测方法，包括采用超高效液相色谱法测定甘松新酮含量的步骤，该方法还包括了采用超高效液相色谱法测定去氧甘松香醇A、蒙花苷、异甘松新酮、甘松香酮H与(‑)‑马兜铃酮含量的步骤，特异性高、稳定性好、重现性高、分析效率高。甘松甲醇提取物与定量的六种成分均具有不同程度的5‑羟色胺转运体(SERT)增强或抑制活性，可在制备用于抗抑郁症、焦虑症、精神分裂症、强迫症、神经退行性等疾病的药物方面进行应用、以及药物成瘾性和消化系统功能紊乱等疾病的治疗药物制备方面进行应用，具有重要的药物开发价值。

技术领域

本发明涉及中药检测分析领域，尤其是一种甘松活性成分的定量检测方法及甘松活性成分与应用。

背景技术

甘松(Nardostachys chinensis Batal.)是败酱科甘松属植物，具有理气止痛，开郁醒脾；外用祛湿消肿的功效，在中医，印度阿育吠陀和尤纳尼医学体系广泛运用于治疗胃肠消化道及神经精神类疾病。甘松已经报道的生物活性包括(1)作用于神经系统，如抗抑郁、镇静和抗惊厥、抗帕金森和记忆恢复；(2)作用于心血管系统，如降血压、抗心律失常、抗心肌缺血、抗心血管损伤；(3)作用于呼吸系统，如增强耐缺氧能力；(4)抑菌；(5)抗肝损伤等。植物化学研究表明其化学成分主要为甘松新酮型倍半萜、马兜铃烷型倍半萜和愈创木烷型倍半萜，以及其它类型萜类化合物。此外，还含有木脂素、黄酮等其他化学成分。

2015年版中国药典仅对于甘松中甘松新酮的含量进行定量检测，而对于蒙花苷等其他主要成分未做含量检测。为了进一步保证甘松的内在质量，本发明在甘松新酮含量的基础上增加了高效液相色谱法测定去氧甘松香醇A、蒙花苷、异甘松新酮、甘松香酮H及(-)-马兜铃酮的含量，使甘松的质量控制的指标更加全面。

SERT属于Na⁺/Cl^-依赖型转运蛋白,主要位于5-HT能神经元。SERT从神经突触间隙中重新摄取5-HT进入突触前神经元，直接影响突触间隙5-HT浓度，改变突触后受体介导信号的量和作用持续时间。此外，发现SERT在胎盘组织、骨髓、肾、肺、心、肾上腺、肝、甲状旁腺、甲状腺、胰腺和小肠等器官亦有分布，与情绪、食欲、睡眠、记忆、学习等许多生理心理功能相关。SERT及5-HT表达改变可引起焦虑、抑郁、强迫症、恐惧症，甚至精神分裂症，并与药物成瘾性密切相关。此外，发现SERT在胃肠道功能性疾病中扮演了重要角色，如临床上慢传输性便秘、肠道易激综合征、功能性腹胀等胃肠功能性疾病，采用针对SERT的抗抑郁药、抗焦虑药物取得了疗效。

SERT是临床药物研发的重要靶点。基于SERT靶点的经典抗抑郁药多属于选择性SERT抑制剂(SSRI)，如氟西汀(Fluoxetine)等；5-羟色胺再摄取促进剂(SSRE)则少有报道，至今已报道SSRE有噻奈普汀(tianeptine)，别名达体朗(stablon)，其化学结构属三环类抗抑郁药，临床主要用于抗抑郁和抗焦虑。实验研究发现噻奈普汀可促进5-HT再摄取，在神经结构可塑性方面，噻奈普汀对应激/皮质酮诱导的海马神经元树突萎缩具有预防作用，能够对抗应激诱发的海马前体细胞增殖、海马体积下降和N-乙酰天冬氨酸浓度下降，并防止杏仁核树突过度增生。在神经兴奋性方面，噻奈普汀能够克服应激阻断海马长时程增强作用，逆转应激对海马-前皮层突触的抑制作用等。在神经保护方面，噻奈普汀能够降低海马和颞叶皮层的细胞凋亡。在记忆功能方面，噻奈普汀对应激诱导空间记忆损害具有阻断作用，增加记忆保留，有助于注意力集中行为，拮抗酒精的有害作用等(McEwen BS,OlieJP.2005.Neurobiology of mood,anxiety,and emotions as revealed by studies of aunique antidepressant:tianeptine.Molecular Psychiatry 10,525–537)。此外，噻奈普汀能使中枢5-HT代谢物5-羟吲哚乙酸升高，推断可能由于突触前膜再摄取-5-HT增加后，神经内5-HT分解代谢相应增高有关；噻奈普汀可作用于下丘脑-垂体-肾上腺轴,使下丘脑皮质激素释放因子及垂体前叶肾上腺皮质激素浓度下降。