[发明专利]一种多颜色可视化快速检测海产品中石房蛤毒素的方法

说明书

本发明公开一种多颜色可视化快速检测海产品中石房蛤毒素的方法，针对海产品中微量石房蛤毒素的现场快速、低成本和高通量检测和筛查的技术难题，开发了一种基于纳米金棒和抗体竞争识别、多颜色区别可视化快速检测海产品中石房蛤毒素（STX）的新方法，为海产品中石房蛤毒素的现场快速、低成本和高通量检测和筛查提供一种更加可靠和灵敏的检测手段。所建立的可视化检测方法具有较高的灵敏度、良好的稳定性和选择性、分析时间短、高通量、不需要大型仪器等明显优势，克服了传统石房蛤毒素检测耗时长、费用高、且需要大型仪器等缺点。

技术领域

本发明具体涉及一种多颜色可视化快速检测海产品中石房蛤毒素的方法，属于石房蛤毒素检测领域。

背景技术

水环境的富营养化污染会引发藻类的大量繁殖产生赤潮现象，大量繁殖的藻类中有些藻类比如甲藻或硅藻或菌类会分泌出藻毒素，统称贝毒。而水环境的中的生物比如贝类或鱼类通过摄食这些藻类会积累贝毒，并通过食物链对人体造成伤害。贝类毒素可分为麻痹性贝毒（PSP）、神经性贝毒（NSP）、腹泻性贝毒（DSP）、西加鱼毒（CFP）、记忆缺失性贝毒（ASP）和氨代螺旋酸贝类毒（AZP）。这些毒素具有热稳定性，不能被正常的烹饪或加热破坏。麻痹性贝类毒素（PSP）是由特定类型的浮游植物产生的强力神经毒素，在所有的海洋藻毒素中，麻痹性贝类毒素（PSP）是世界上分布最广泛的毒素之一，严重危害了海产品养殖业的健康发展。石房蛤毒素（STX）是已知麻痹性贝类毒素中毒性最强的毒素，它的毒性高，通过阻断Na⁺通道从而阻断神经冲动的传导并导致一系列神经障碍症状，甚至导致死亡。所以，欧盟和美国食品药物管理局（FDA）对海产品中的石房蛤毒素的限量标准是40-80µg/100g（0.4-0.8 ppm）。在我们国家东南沿海地区时有因食用被贝毒污染的海鲜而引起的石房蛤毒素中毒事件发生，给人的健康带来极大风险，至2013年已经有50000名中毒受害者。因此，对海产品中的石房蛤毒素（STX）的含量进行检测对人类健康和环境安全具有重要的意义。

目前检测石房蛤毒素（STX）的方法主要有毛细管电泳、体外细胞测定、液相色谱串联质谱、小鼠实验测定、表面增强拉曼光谱和表面等离子体共振等。但是这些方法都需要比较昂贵的大型仪器和具有娴熟技巧的专业人员、耗时较长、耗费比较高，无法用于海产品中石房蛤毒素（STX）的现场快速检测。近年，也有一些电化学生物传感和酶链免疫（ELISA）方法被开发用于石房蛤毒素（STX）的快速检测，但是电化学生物传感稳定性和抗干扰能力差，无法在实际检测中使用。酶链免疫（ELISA）方法灵敏度较低，且存在假阳性可能，无法满足海产品中石房蛤毒素（STX）现场快速检测的实际需要。因此研发一种快速、高通量、不需要大型仪器的石房蛤毒素的特异快速检测和筛查方法，对保证海产品的安全消费具有十分重要的意义。

发明内容

本发明针对海产品中微量石房蛤毒素的现场快速、低成本和高通量检测和筛查的技术难题，开发了一种基于纳米金棒和抗体竞争识别、多颜色区别可视化快速检测海产品中石房蛤毒素（STX）的新方法，为海产品中石房蛤毒素的现场快速、低成本和高通量检测和筛查提供一种更加可靠和灵敏的检测手段。所建立的可视化检测方法具有较高的灵敏度、良好的稳定性和选择性、分析时间短、高通量、不需要大型仪器等明显优势，克服了传统石房蛤毒素检测耗时长、费用高、且需要大型仪器等缺点。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明利用抗体实现对石房蛤毒素（STX）的特异识别，以纳米金棒作为颜色信号，采用竞争法建立了一种多颜色区别、可视化快速检测海产品中石房蛤毒素（STX）的新方法。方法因具有灵敏度较高、稳定性和选择性良好、分析时间短、高通量、不需要仪器和可视化等优点，可用于各种海产品中中石房蛤毒素现场快速检测和筛查。

该方法的具体步骤如下：