[发明专利]一种快速检测藻细胞破裂程度的方法在审
| 申请号： | 201810074733.8 | 申请日： | 2018-01-25 |
| 公开（公告）号： | CN108287139A | 公开（公告）日： | 2018-07-17 |
| 发明（设计）人： | 谭啸;段志鹏;戴凯文;刘倩倩;舒筱倩;顾惠卉 | 申请（专利权）人： | 河海大学 |
| 主分类号： | G01N21/31 | 分类号： | G01N21/31 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 刘奇 |
| 地址： | 210000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 藻悬液 破裂 标准曲线 待测样品 吸光度 波长 破碎 快速检测 微藻细胞 上清液 波长吸光度 细胞 破碎处理 线性拟合 计数法 藻细胞 吸光 制备 | ||
1.一种快速检测微藻细胞破裂程度的方法，包括以下步骤：
1)制备破碎处理的藻悬液待测样品；
2)离心所述破碎处理的藻悬液待测样品，获得上清液；
3)测定所述步骤2)获得的上清液在425～450nm波长处的吸光度Ax或在670～690nm波长处的吸光值Ax’，根据预定的两处波长吸光度值对应的标准曲线计算得到待测样品的微藻细胞破裂程度CDx；
所述标准曲线的获得方法为：测定破碎藻悬液标样在所述波长处的吸光度值、采用计数法计算得到所述破碎藻悬液标样的细胞破裂程度，根据所述破碎悬浮标样的吸光度值和细胞破裂程度，线性拟合得到标准曲线。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述离心的转速为10000～15000g。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述离心时间为10～30min。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)中所述波长为430～440nm或675～685nm。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述破碎藻悬液标样由超声波处理初始未破裂藻悬液样品不同时间获得所述不同破裂程度的微藻标样。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，未经过超声波处理的藻悬液的初始细胞浓度为103～107cells/mL。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述的超声波的频率为20～40kHz。
8.根据权利要求5或7所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述超声波的功率为0.01～0.1W/cm3。
9.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述超声波处理的时间为0～250min。
10.根据权利要求5或7所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述超声波处理的温度为10～30℃。
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