[发明专利]利用双三元泵在线检测血液中卡马西平药物含量的方法

说明书

本发明的发明名称为利用双三元泵在线检测血液中卡马西平药物含量的方法，它是使用高效液相色谱分析仪和DAD检测器对标准溶液进行标定，拟合得到标准曲线方程为y＝a*x+b，取待测血液样品，在该待检测血液经过处理后，同样使用高效液相色谱分析仪和DAD检测器对待测的样品进行检测，得到待测血液y值，将待测血液y代入标准曲线方程中，通过计算得到待检测血液中的卡马西平药物浓度，该方法准确、快速、特异性强，具有较高的分离度和灵敏度，为临床上卡马西平的血药浓度监测提供了可靠的实验数据，更便于医生为患者及时提供准确的卡马西平给药方案。

技术领域

本发明涉及一种精神类药物的药物浓度监测技术领域，尤其涉及一种检测血液中药物卡马西平浓度的方法。

背景技术

卡马西平(Carbamazepine，CBZ)，分子式C15H12N2O，其化学结构为5H-二苯并[b，f]氮杂卓-5-甲酰胺，具体结构如图1所示。CBZ常用于对抗癫痫发作，是简单部分性发作尤其是复杂部分性癫痫的首选药物，对大发作、局限性发作和混合型癫痫亦有疗效。此外，另有临床精神疾病研究指出，其可用于治疗精神分裂症和双相型障碍等。该药物有效浓度为4-12mg/L，具有安全范围小、体内代谢个体差异大、毒性较强等特点，且其疗效和不良反应与血液中药物浓度密切相关，故有必要对其进行药物浓度监测。

目前，卡马西平药物浓度监测的常见方法有：紫外分光光度法、荧光偏振免疫法、高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用法、液相色谱-质谱联用法等。在众多的方法中，液相色谱法为测定卡马西平的最准确的方法。以往方法存在前处理复杂、不能重现结果，干扰因素多、分析时间长、灵敏度不高、定性定量不够准确等问题。

发明内容

针对上述技术问题，本发明目的是提供利用在线固相萃取技术检测血液中卡马西平药物浓度的方法，该方法前处理方法简单高效，定量准确快速，特异性强，大大缩短了整体分析时间，更利于进行大通量样本的分析。

本发明采用以下技术方案：

本发明的一种利用双三元泵在线检测血液中卡马西平药物含量的方法，其中：它包括以下步骤：

(一)标准溶液的标定

首先将至少三种不同浓度的标准工作液10μL和90μL的由1∶1的甲醇和水组成的稀释液分别置于1.5mL离心管中混合制成至少三种标准溶液，上述标准溶液分别在转速为g00-1200rpm下涡旋混匀1-2min后，用高效液相色谱分析仪和DAD检测器对上述至少三种标准溶液进行检测，得出上述至少三种标准溶液的卡马西平色谱图，以上述至少三个标准溶液的卡马西平峰面积作为标准曲线图的纵坐标y，以上述标准工作液中含有卡马西平的浓度作为标准曲线图的横坐标x，将以上检测所得至少三组数据进行线性回归，拟合得到标准曲线方程为y＝a*x+b，并且得出权重系数a和b；所述标准工作液为含有卡马西平的溶液；

(a)标准工作液的配制：

精确称取卡马西平标准品15mg置于10mL容量瓶，用甲醇进行溶解，并定容于10mL，得到标准储备液，将标准储备液用含水量为20％-60％的甲醇溶液的稀释液进行稀释，分别在含有5-400mg/L卡马西平的范围内配置出各标准工作液，并在-80℃条件下保存；

(二)检测血液的离心

取待检测血液至少5mL，在离心速度为3500rpm下离心10min，取上清液得血清或血浆，上述血清或血浆置于-20℃冷冻下保存至分析前备用；

(三)待测样品处理

(b)用一次性无菌注射器吸取步骤(二)中的血清或血浆350μL，然后将上述无菌注射器前端连接针孔滤膜，将上述血清或血浆进行过滤后，将其移入1.5mL管中，得到待测样品；