[发明专利]一种甲氨蝶呤前药及其双靶向纳米粒子的制备方法

权利要求书

1.一种甲氨蝶呤前药的制备方法，其特征在于：包括：

1)将透明质酸溶于第一有机溶剂中，20～40℃下加热至透明质酸溶解后冷却到室温，再加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，搅拌反应至少1h；将十八胺溶于第二有机溶剂后，加入至上述溶液中；所述十八胺与透明质酸单体的摩尔比为5:1～1:1；所述1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺与透明质酸单体的摩尔比、N-羟基琥珀酰亚胺与透明质酸单体的摩尔比均为8:1～1:1；然后在隔绝氧气的条件下，55～65℃搅拌至少5h，再在室温下搅拌22～26h；得到的混合溶液用体积比1:3～1:1的水-乙醇混合液透析45～50h，再用水透析45～50h，过滤，冷冻干燥，得到透明质酸-十八胺结合物；

2)将甲氨蝶呤溶于第三有机溶剂中，再加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和4-二甲氨基吡啶，搅拌反应至少30min；将步骤1)得到的透明质酸-十八胺结合物溶于第三有机溶剂后，加入至上述溶液中；所述甲氨蝶呤与透明质酸-十八胺结合物中的透明质酸单体的摩尔比为5:1～1:1；所述1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺与甲氨蝶呤的摩尔比、4-二甲氨基吡啶与甲氨蝶呤的摩尔比均为4:1～1:1；然后避光、室温反应45～50h，用水透析45～50h，冷冻干燥，得到甲氨蝶呤前药，为甲氨蝶呤-透明质酸-十八胺结合物。

2.根据权利要求1所述的甲氨蝶呤前药的制备方法，其特征在于：所述第一有机溶剂为无水甲酰胺、水中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的甲氨蝶呤前药的制备方法，其特征在于：所述第二有机溶剂为二甲基甲酰胺、乙醇中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的甲氨蝶呤前药的制备方法，其特征在于：所述第三有机溶剂为四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、无水甲酰胺、甲醇、乙醇、乙腈、丙酮中的至少一种。

5.根据权利要求1所述的甲氨蝶呤前药的制备方法，其特征在于：所述透析采用的透析袋的截留分子量为1000～10000。

6.一种根据权利要求1至5中任一项所述的制备方法所制备的甲氨蝶呤前药。

7.一种甲氨蝶呤前药的双靶向纳米粒子的制备方法，其特征在于：包括：根据权利要求1至5中任一项所述的制备方法制备得到甲氨蝶呤-透明质酸-十八胺结合物，将其分散于水中，-5～5℃下超声处理，再在室温下搅拌22～26h，自组装得到甲氨蝶呤-透明质酸-十八胺双靶向纳米粒子分散液。

8.根据权利要求7所述的甲氨蝶呤前药的双靶向纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述超声处理的功率为100～300W，持续时间为3～6s，间隔时间为2～4s。

9.根据权利要求7所述的甲氨蝶呤前药的双靶向纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述超声处理的时间为8～20min。

10.一种根据权利要求7至9中任一项所述的制备方法所制备的甲氨蝶呤前药的双靶向纳米粒子，其特征在于：所述甲氨蝶呤前药的双靶向纳米粒子为球形，粒径为60～120nm。