[发明专利]一种以活体黄粉虫幼虫为寄主培育蛹虫草的方法

权利要求书

1.一种以黄粉虫活体幼虫为寄主培育蛹虫草的方法，包括步骤如下：

(1)菌液制备

在液体培养基中于无菌条件下接种蛹虫草斜面菌种，恒温摇床160～180 r/min、24℃培养5～6 d；当菌丝生物量干重达到500～600mg/100mL时，无菌条件下打碎至粒径200～300 μm，得菌液；

（2）培养载体

在容器内将细砂粒和水按重量比为1︰0.1～0.15混合，密封灭菌；

(3)寄主选择

选择体长2.6～3.3cm、7龄第5～6d的黄粉虫幼虫作为寄主；

(4) 寄主处理

将步骤（3）选择的黄粉虫幼虫用酒精对体表擦拭消毒；

（5）活体接种

在步骤（4）处理后的每个活体黄粉虫幼虫第3、4体节间体内注入0.05～0.1 mL菌液，放入步骤（2）制备的培养载体上；

(6)发菌培养

将步骤(5)接种的黄粉虫幼虫在20～22℃环境下避光培养7～10 d；

(7)见光培养

当步骤（6）培养的虫体体节间有可见菌丝时，将其置于环境温度为19～20℃，湿度为70～75％，光照强度为400～1000 Lx的培养室内24h见光培养；

（8）子实体培养

步骤(7)培养的虫体原基长至0.5～1 cm高时，调整光照强度为200～400 Lx，培养温度为19～23℃，湿度为85～95％，每天见光6～9 h，培养时间为30～35 d，即得蛹虫草产品。

2.根据权利要求1所述的以黄粉虫活体幼虫为寄主培育蛹虫草的方法，其特征在于，步骤（1）中蛹虫草液体培养基的接种量为4～6块1 ～3 mm²的斜面菌种块，菌液粒径为200～300 μm。

3. 根据权利要求1所述的以黄粉虫活体幼虫为寄主培育蛹虫草的方法，其特征在于，步骤（1）中所述的液体培养的营养组成为：每升水中含有葡萄糖20g、蛋白胨5g、酵母膏3g、维生素B₁ 0.5mg、花生油0.5mL。

4. 根据权利要求1所述的以黄粉虫活体幼虫为寄主培育蛹虫草的方法，其特征在于，步骤（2）中灭菌的方式为：用0.11 MPa、121℃的水蒸汽灭菌50 min，冷却至室温。

5.根据权利要求1所述的以黄粉虫活体幼虫为寄主培育蛹虫草的方法，其特征在于，步骤（2）中密封方式为采用聚丙烯薄膜密封。

6.根据权利要求1所述的以黄粉虫活体幼虫为寄主培育蛹虫草的方法，其特征在于，步骤（4）中所述的酒精体积浓度为70-80%。

7.根据权利要求1所述的以黄粉虫活体幼虫为寄主培育蛹虫草的方法，其特征在于，步骤（6）、（7）中所述的培养均为密闭培养，密闭的方式为采用聚丙烯薄膜密封；

步骤（7）中光照强度为600～900 Lx、24h见光。

8. 根据权利要求1所述的以黄粉虫活体幼虫为寄主培育蛹虫草的方法，其特征在于，步骤（8）中所述的培养为开口培养，开口培养的方式为在聚丙烯薄膜上扎4～6个孔径为2mm的圆孔，光照强度为200～400 Lx、6～9h见光。