[发明专利]一种利用食用菌废菌棒生产地衣芽孢杆菌菌肥的方法

权利要求书

1.利用食用菌废菌棒生产地衣芽孢杆菌菌肥的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤(1)液体菌种的制备：以地衣芽孢杆菌为菌种，以NA培养基为液体菌种用培养基，制备液体菌种A；

步骤(2)液体菌种的扩大培养：将步骤(1)得到的液体菌种A放进摇瓶中培养，转速为180r/min，温度为30±1℃，培养时间为18～24h，得到液体菌种B。

步骤(3)地衣芽孢杆菌固体菌肥的制备：以废菌棒与麸皮或蔗渣或糖蜜混合后作为制备菌肥生产的固体基础培养基，分装发酵罐中，灭菌后，接种步骤(2)所制备的液体菌种B，30～35℃恒温下发酵30～72h，发酵结束后将其拌匀，即得地衣芽孢杆菌菌肥；

2.根据权利要求1所述的利用食用菌废菌棒生产地衣芽孢杆菌菌肥的方法，其特征在于：

所述步骤(1)液体菌种的制备为：用接种环将地衣芽孢杆菌菌株的单菌落接种于NA液体培养基中，于恒温培养箱中培养24h，培养温度设定为30±1℃，得到液体菌种A；

所述步骤(2)液体菌种的扩大培养为：将液体菌种A接种于LB液体培养基中，温度设定为30℃，恒温培养24h，然后置于恒温摇瓶振荡培养，转速180r/min，温度设定为30±1℃，培养18～24h，即得液体菌种B。

3.根据权利要求2所述的食用菌废菌棒生产地衣芽孢杆菌菌肥的方法，其特征在于：所述NA培养基由以下重量百分比的组分组成：牛肉浸膏0.3％，蛋白胨0.5％，酵母膏0.5％，氯化钠0.2％，琼脂1.8％，余量为水，所述NA培养基pH为7.0；所述LB液体培养基由以下重量百分比的组分组成：牛肉浸膏0.3％，蛋白胨0.5％，酵母膏0.5％，氯化钠0.2％，余量为水，所述LB液体培养基pH为7.0。

4.根据权利要求1所述的利食用菌废菌棒生产地衣芽孢杆菌菌肥的方法，其特征在于：所述步骤(3)中地衣芽孢杆菌固体菌肥的制备步骤为：

步骤A.以废菌棒为主要成份的固体基础培养基配制：所述废菌棒与麸皮重量比为2:3～4:1配制，所述废菌棒与蔗渣或糖蜜按重量比为1:4～4:1配制形成固体基础培养基；

步骤B.基础培养基中其他成分的添加：在固体基础培养基中按质量比添加K₂HPO40.2％、K₃PO₄0.4％，无水硫酸镁0.2％，酵母粉0.2％，搅拌均匀后加水，调整含水体积比为30％～50％，转入发酵罐中，发酵罐中装料量控制在10％-30％体积比范围内灭菌；

步骤C.地衣芽孢杆菌固体菌肥的培养与制备：往步骤A的培养基中接种步骤(2)中制备的液体菌种B，按接种量3％(v/g)体积接种，30～32℃恒温下发酵15-47小时，即地衣芽孢杆菌固体发酵产物，发酵结束后将其通风干燥后拌匀，即得地衣芽孢杆菌菌肥。

5.根据权利要求4所述的食用菌废菌棒生产地衣芽孢杆菌菌肥的方法，其特征在于：

所述步骤A中，所述微生物废菌棒与蔗渣或糖蜜按重量比为4:1配制形成固体基础培养基；

所述步骤B中，调整含水体积比为40％，转入发酵罐中，发酵罐中装料量控制在30％体积比范围；

所述步骤C中，接种完成后，在30℃恒温下发酵32小时，即地衣芽孢杆菌固体发酵产物，发酵结束后将其通风干燥后拌匀，即得地衣芽孢杆菌菌肥。