[发明专利]一种利用食用菌废菌棒生产地衣芽孢杆菌菌肥的方法

说明书

本发明提供一种利用食用菌废菌棒生产地衣芽孢杆菌菌肥的方法，步骤如下：以地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)为菌种，以LB液体培养基为液体菌种用培养基，制备生产用液体菌种；以食用菌废菌棒与麸皮或蔗渣或糖蜜混合后作为制备菌肥生产的固体基础培养基，分装于发酵罐中，灭菌后，接种液体菌种，30～35℃恒温下发酵30～72h，制备地衣芽孢杆菌固体发酵产物，发酵结束后将其拌匀，即得地衣芽孢杆菌菌肥。本发明采用固态发酵方式，利用食用菌废菌棒含有丰富的菌体蛋白、多种代谢产物，作为固态发酵培养基成份之一，即可为菌株发酵提供所需养分，降低生产成本，又可降低农副产品废弃物对环境的污染,提高地衣芽孢杆菌活菌数含量，提高肥效。

【技术领域】

本发明涉及生物肥料制作领域，特别涉及一种利用废菌棒生产地衣芽孢杆菌菌肥的方法。

【背景技术】

地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)是一类需氧或兼性厌氧G+细菌，在一定条件下能产生抗逆性内生孢子，产生脂肽类、肽类、磷脂类、多烯类、氨基酸类、核酸类物质等多种抗生素。这些抗生素对多种动、植物及人类病原菌起到很好的抑制作用。地衣芽孢杆菌还产生蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶等。进入2l世纪以来，关于地衣芽孢杆菌在饲料工业上的应用研究很多，在医药、畜牧、水产业等中都有广泛的应用，地衣芽孢杆菌包含在农业部允许的添加剂菌种目录中，已广泛应用于医药、农药、食品、饲料加工、环境污染治理等各个行业，是芽孢杆菌中较具应用潜力的菌种之一。目前，地衣芽孢杆菌固态肥料混合品很多，原材料为麸皮、米糠、黄豆粉饼、花生粉饼等农业副产物，存在价格高、高温灭菌后粘度增加、疏松度不够、空隙小、后续接种困难等问题，且质量参差不齐，有些所含杂菌数不符合要求，但杂菌率高，影响了地衣芽孢杆菌菌肥的肥效性。食用菌，是一个“短平快”产业，其营养丰富，口味鲜美，已逐渐成为人们餐桌上的新宠。在我国政府一系列方针政策的指引下，迎来了前所未有的良好机遇，其产量占世界总产量的70％以上，其总产值在中国种植业中的排名仅次于粮、棉、油、菜、果，居第六位，是我国农民发家致富的新途径。据统计，2014年，全国食用菌种植产量达3169万吨，随着食用菌大规模的种植兴起，其栽培废弃物伴随而生，越来越多。据统计，我国每年食用菌栽培产生的栽培废弃物高达3000万吨以上未能得到有效的循环利用，被随意堆放在房前屋后、路旁、地头、河渠沟谷中，对水源、空气、土壤与环境造成了严重污染，给食用菌产业的发展、人民生活环境和生活质量带来一系列的负面影响，食用菌废弃物中含有丰富的菌体蛋白、多种代谢产物及未被充分利用的营养物质等大量资源，可考虑作为地衣芽胞杆菌固态发酵原料进行生产。

【发明内容】

鉴于上述内容，有必要提供一种利用食用菌废菌棒生产地衣芽孢杆菌菌肥的方法，利用废菌棒食用菌废弃物中含有丰富的菌体蛋白、多种代谢产物，作为固态发酵培养基成分之一，为地衣芽孢杆菌菌株提供养分，降低生产成本，又可降低食用菌废菌棒对环境的污染，同时提高地衣芽孢杆菌活菌数含量，提高肥效。

为达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：

步骤(1)液体菌种的制备：以地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)为菌种，以NA培养基为液体菌种用培养基，制备液体菌种A；

步骤(2)液体菌种的扩大培养：将步骤(1)得到的液体菌种放进摇瓶中培养，转速为180r/min，温度为30±1℃，培养时间为18～24h，得到液体菌种B。

步骤(3)地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)固体菌肥的制备：以废菌棒与麸皮或蔗渣或糖蜜混合后作为制备菌肥生产的固体基础培养基，分装发酵罐中，灭菌后，接种步骤(2)所制备的液体菌种B，30～35℃恒温下发酵30～72h，制备地衣芽孢杆菌固体发酵产物，发酵结束后将其拌匀，即得地衣芽孢杆菌菌肥；

所述步骤(1)液体菌种的制备为：用接种环将地衣芽孢杆菌菌株的单菌落接种于NA液体培养基中，于恒温培养箱中培养24h，培养温度设定为30±1℃，得到液体菌种A；