[发明专利]一种基于CuInZnS/ZnS量子点的增强型电化学发光剂的制备及其应用

权利要求书

1.一种基于CuInZnS/ZnS量子点的增强型电化学发光剂的制备方法，其特征在于：包含如下步骤：

步骤一：CuInZnS/ZnS量子点的制备

1)将氯化铜、氯化铟、氯化锌和蒸馏水按(1～3):(1～14):(1～14):(100～300)的摩尔比例混合；向体系内加入巯基丙酸，氯化铜和巯基丙酸摩尔比为1：1～1：5，溶液变浑浊，产生黄色颗粒；

2)再向溶液中加入氢氧化钠调节pH为7～12，沉淀消失，溶液变为澄清；

3)继续搅拌5～60分钟后，向上述体系中加入硫脲，硫脲和氯化铜的摩尔比为3：1～15：1，待其溶解后，溶液变为淡粉色；

4)将全部溶液转移到聚四氟乙烯的反应釜中，反应釜放置于烘箱中2～36个小时，温度在60～250℃，继续向体系中加入氯化锌、柠檬酸钠、巯基丙酸和硫化钠，氯化锌、柠檬酸钠、巯基丙酸、硫化钠和上述加入的氯化铜的摩尔比为(1～50):(2～50)：(5～100)：(1～20)：1，在50～150℃条件下加热1～24小时，取出后冷却至室温，将产物离心分离后，用无水乙醇反复清洗3～5次，得到CuInZnS/ZnS量子点；

步骤二：基于CuInZnS/ZnS量子点的增强型电化学发光剂的制备方法，其步骤如下：

1)氯金酸和蒸馏水的质量比为1：20000～1：100000混合，回流加热至沸腾，加入柠檬酸钠，柠檬酸钠和氯金酸质量比为1：1～1：5，溶液颜色由浅黄色变为深红色，离心后得到金纳米粒子；

2)将金纳米粒子、多巴胺和蒸馏水混合，纳米粒子、多巴胺和蒸馏水质量比为1：1：50000～1：5：100000，溶液pH调控范围为6-10，在4℃-80℃间下搅拌0.5～24小时，溶液变为棕色，采取透析分离方式，透析2-24小时，用水和无水乙醇反复清洗3-5次，制备得到包裹金纳米粒子的聚多巴胺微球；

3)将CuInZnS/ZnS量子点、包裹金纳米粒子的聚多巴胺微球和蒸馏水按质量比1:5:100000～5:10：1000000混合，在25～60℃条件下震荡20～1200分钟，将产物离心分离后，用无水乙醇反复清洗3～5次，得到基于CuInZnS/ZnS量子点的增强型电化学发光剂。

2.如权利要求1所述的一种基于CuInZnS/ZnS量子点的增强型电化学发光剂在制备基因检测方面的电化学发光传感器的应用，其特征在于，包含如下步骤：

1)将玻碳电极浸泡于0.001～0.01g/L的聚二烯丙基二甲基氯化铵溶液中5～60分钟；

2)氮气吹干后浸泡于0.001～0.01g/L的聚丙乙烯磺酸钠溶液中5～60分钟；

3)氮气吹干后，在电极表面滴涂可以和目标基因发生特异性结合的捕获DNA，滴涂量为电极有效面积每平方毫米1～5nmol捕获DNA，再将电极与已知不同浓度的目标基因，在室温至100℃条件下反应5～60分钟，电极有效面积每平方毫米加入0～3nmol；

4)再将上述电极与氨基修饰的和目标基因同序列的探针DNA及增强型电化学发光剂在室温至100℃条件下反应5-60分钟，氨基修饰的探针DNA和增强型电化学发光剂的比例为电极有效面积每平方毫米加入1～3nmol探针DNA和10～50μg增强型电化学发光剂，按电极有效面积每平方毫米加入0.02～1mmol过硫酸钾作为共反应物，在-2.5～2.5V的电压条件下，读取电致化学发光强度，以电致化学发光强度为纵坐标，以目标DNA浓度为横坐标，绘制分析工作曲线，将电极置于未知浓度的目标DNA中，读取电致化学发光强度，从而计算其浓度。