[发明专利]一种富铜酵母产品及其生产方法

权利要求书

1.一种富铜酵母产品的生产方法，其特征在于包括如下步骤：

1)制备耐高铜的酵母菌种

1.1)分别配置不同铜浓度的的麦芽糖培养基，将啤酒酵母菌种分别接种不同铜浓度的的麦芽糖培养基中培养；培养后选定菌种部分存活的含铜溶度最高的麦芽糖培养基；该麦芽糖培养基中存活菌种作为诱变菌种；

1.2)将诱变菌种接种到诱变培养基上进行诱变培养25～30h；

1.3)将诱变后的菌株进行分离筛选，接种到含铜的麦芽糖培养基中培养，筛选出抗铜能力强的菌种，即为耐高铜富铜酵母菌种；

2)高铜含量富铜酵母的生产工艺

2.1)斜面菌种培养：耐高铜富铜酵母菌种接种于糖含量5～20％，含铜量50～120μg/ml，pH值4.0～5.5的麦芽汁固体培养基上，培养温度28～30℃，培养25～30h，得到斜面酵母菌种；

2.2)一级液体种子培养：将斜面酵母菌种稀释至菌株数496万/ml，取2ml稀释液接种于装有250ml糖含量5～20％，含铜量50～120μg/ml，pH值4.0～5.5的麦芽汁培养基的三角瓶中，培养温度28～30℃，培养25～30h，得到一级液体种子培养液；

2.3)二级液体种子培养：将100ml一级液体种子培养液接种于装有50～100L糖含量5～20％，含铜量50～120μg/ml，pH值4.0～5.5的麦芽汁培养基的发酵罐中，培养温度28～30℃，培养25～30h，得到二级液体种子培养液；

2.4)发酵罐培养：将1000ml二级液体种子培养液接种于装有1000～2000L糖含量5～20％，含铜量50～120μg/ml，pH值4.0～5.5的麦芽汁培养基的发酵罐中，培养温度28～30℃，培养25～30h，得到富铜酵母培养液；

2.5)分离干燥：分离机分离，60～90℃烘干；

2.6)粉碎：粉碎机粉碎后既得到富铜酵母产品，铜含量为每千克酵母2000～5000毫克。

2.如权利要求1所述的生产方法，其特征在于所述的步骤1.1)和步骤1.3)中的含铜的麦芽糖培养基的总糖含量5～20％，含铜量50～120μg/ml，pH值4.0～5.5，培养温度28～30℃，培养25～30h。

3.如权利要求1所述的生产方法，其特征在于所述的步骤1.3)中的含铜的麦芽糖培养基的含铜量高于步骤1.1)中的含铜的麦芽糖培养基。

4.如权利要求1所述的生产方法，其特征在于所述的步骤1.2)中的诱变培养基中的诱变剂为N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍，浓度1.8～3.2mg/mL，总糖含量5～20％，pH值4.0～5.5。

5.如权利要求1所述的生产方法，其特征在于所述含铜的麦芽糖培养基所含铜为无机铜，所述的无机铜包括氧化铜、硫酸盐、碳酸盐或氯化物盐；所述麦芽糖培养基和诱变培养基的氮源为尿素、硝酸铵、硫酸铵和磷酸氢氨中的一种或几种；所述麦芽糖培养基和诱变培养基的磷源为植酸钙、磷酸氢氨、磷酸氢二氨、磷酸氢二钾中的一种或几种。

6.一种如权利要求1所述方法制备得到的富铜酵母产品。

7.权利要求6所述富铜酵母产品在制备动物饲料中的应用。