[发明专利]用于治疗勃起障碍的干细胞制剂的制备和使用方法

说明书

一种用于治疗勃起障碍的干细胞制剂的制备和注射方法，包括以下步骤：血管内皮干细胞的培养、血管内皮干细胞的鉴定及检测、血管内皮干细胞的冻存、及血管内皮干细胞制剂的制备与激活。本发明利用一种体外激活剂将复苏后的血管内皮干细胞激活后直接使用，一方面避免了复苏后需经培养激活才能保持最佳活力的过程，另一方面增加了血管内皮干细胞刺激生成海绵体血管的能力，更利于未来临床的开展。作为治疗男性勃起障碍的药物，其单独使用，治疗男性勃起障碍效果较好。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种用于治疗勃起障碍的干细胞制剂的制备和使用方法。

背景技术

勃起障碍(Erectile Dysfunction,ED)俗称阳痿，就是反复在性交过程中不能够或不能维持足够坚挺的阴茎勃起。75％的勃起障碍是由于下列疾病原因引起：糖尿病、肾病、长期饮酒、多发硬化、血管粥样硬化、血管性病变、神经性疾病。这些疾病可导致阴茎神经、动脉血管、平滑肌以及海绵体组织的损伤，从而引发阴茎勃起功能障碍。针对ED发生的不同原因，现有主要治疗手段包括心理治疗、药物治疗、阴茎假体植入术、动脉血管重建及静脉结扎。

虽然，目前临床上一些V型磷酸二酯酶(phospho-diesterase type v)抑制剂药物如伟哥 (Viagara)等，广泛用于阳痿的治疗，但是，上述疾病引起的勃起障碍往往对这些药物没有呈现治疗效果，反而还会引起一些严重的副作用。美国洛杉矶Cedars-Sinai的科研人员发现伟哥在一些病人中可引起死亡及严重的心血管系统副作用。综观目前临床上上所有用于勃起障碍治疗的药物，大都是采用激素或刺激物质为基础的药物，他们只是发挥短暂的效应，还要终生服药，并且会引起一系列副作用包括高血压、中风和心脏病等。此外服用伟哥等药物就像“轮盘赌博”患者往往随着时间的推移，服用药物的剂量越来越大才能取得原先相同的效果，因此副作用风险也越来越高。因此，服用伟哥之类的治疗阳痿药物一方面只有短期的治标不治本效果，另一方面还面临严重的副作用包括死之风险。同时，由于长期甚至终身服药会给患者带来经济负担。

发明内容

为解决现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供一种用于治疗勃起障碍的血管内皮干细胞制剂的制备和使用方法。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种用于治疗勃起障碍的干细胞制剂的制备方法，包括以下步骤：血管内皮干细胞的培养、血管内皮干细胞的鉴定及检测、血管内皮干细胞的冻存、及血管内皮干细胞制剂的制备与激活；其中，

所述血管内皮干细胞的培养，包括以下步骤：

①带无菌手套，取出选好的健康脐带，在止血钳内侧用碘酒和酒精棉球消毒后，用无菌剪刀将两端脐带剪除；

②在脐带一端找到静脉，插入脐带静脉插管，用2根粗丝线扎牢，用30ml注射器抽吸 Cord Buffer冲洗静脉腔，至将脐血洗净；

③赶出静脉腔内残余液体，将脐带另一端用止血钳夹闭，用10ml注射器连接针头，注入 37℃预热的0.1％胶原酶约6-8ml，放入37℃Cord Buffer中保温6-10min；

④吸出静脉腔内胶原酶所消化的细胞悬液，加入预加有20ml cord Buffer的离心管中，再冲洗静脉腔，一并加入离心管中；

⑤离心，1500rpm，10min，弃上清，收集细胞；

⑥配制培养液；

⑦用新鲜配制的培养液重悬步骤⑤所收集的细胞，吸入T75培养瓶；

⑧置于37℃、5％CO2培养；

⑨细胞长至80-90％左右，开始消化、传代；

所述血管内皮干细胞的鉴定及检测，包括流式鉴定、内毒素检测、真菌细菌检测和支原体检测；