[发明专利]一种高产胞外多糖旧金山乳杆菌Ls-1001菌株培养方法

说明书

本发明公开了一种高产胞外多糖旧金山乳杆菌Ls‑1001菌株培养方法，包括以下步骤：将冻藏的旧金山乳杆菌斜面菌种用灭过菌的生理盐水进行稀释，直至测得在600nm处的吸光度值A=0.5为止，然后按体积分数为2%接种到100mL添加有生长促进因子的液体培养基中进行厌氧培养，培养基pH为5.0‑5.4，培养温度是30‑32℃，培养34‑36小时。本发明使旧金山乳杆菌Ls‑1001的菌种产量、胞外多糖产量与之前相比分别提高了4.6倍、1.4倍，培养时间缩短了10‑12h，具有明显的增产效果，也为今后工业化生产奠定了基础。

技术领域

本发明涉及一种高产胞外多糖旧金山乳杆菌Ls-1001菌株培养方法，属于食品微生物

领域。

背景技术

酸面团，在我国一般被称为“老面”、“酵子”、“面肥”等，具有悠久的使用历史。上世纪80 年代，即发活性干酵母被引入我国，因其使用便捷，传统面食发酵剂逐渐被取代，但直到现在仍有很多地区尤其农村地区，仍然使用其制备馒头等主食，因使用传统面食发酵剂制备的馒头品质更优。究其原因，是其中复杂的微生物体系使得发酵的馒头风味香气最佳，对感官品质有较好的影响。而旧金山乳杆菌的应用对发酵面制品的风味、色泽、保存期等具有良好的效果。

旧金山乳杆菌（Lactobacillus sanfranciscensis），一种专性异型发酵乳酸菌，是面制品发酵过程中重要的乳酸菌，在酸面团的发酵过程中起着重要的作用。旧金山乳杆菌可水解麦芽糖释放葡萄糖。此外，旧金山乳杆菌产生的胞外多糖（EPS）对改善面包的比容、结构品质、硬度、稳定性和保存期限均有很好的作用。据文献报道，乳酸菌产生的胞外多糖还具有抗肿瘤作用。Antonio Alfonzo等人的研究表明从面粉中分离出的旧金山乳杆菌菌株表现出抗李斯特菌活性。

目前，以活性干酵母为发酵剂蒸制的馒头口感单一、风味略显不足，而旧金山乳杆菌的添加能使面包具有更好的风味和质地，且效果显著。因此，该菌具有良好的研究价值和发展前景。但目前针对旧金山乳杆菌菌种的工业化生产尚未成熟，究其原因主要是对菌种的特性和培养条件尚未清晰认识。本实验以实验室保藏菌株高产胞外多糖的旧金山乳杆菌Ls-1001，对其培养条件进行了研究，获得了旧金山乳杆菌Ls-1001的培养方法，为旧金山菌种的工业化生产提供理论参考依据。

发明内容

本发明旨在提供一种高产胞外多糖旧金山乳杆菌Ls-1001菌株培养方法，以实验室保藏菌株高产胞外多糖的旧金山乳杆菌Ls-1001，对其培养条件进行了研究，获得了旧金山乳杆菌Ls-1001的培养方法，为旧金山菌种的工业化生产提供理论参考依据；该方法能够有效提高菌种产量。

本发明采用的菌株为旧金山乳杆菌，其菌株为旧金山乳杆菌Ls-1001，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期：2017年6月12日，保藏编号：CGMCC No.14232，分类命名：旧金山乳杆菌Lactobacillus sanfrancisco。

本发明提供了一种高产胞外多糖旧金山乳杆菌Ls-1001菌株培养方法，包括以下步骤：

旧金山乳杆菌Ls-1001的富集培养：将冻藏的斜面菌种用灭过菌的生理盐水进行稀释，直至测得在600nm处的吸光度值A=0.5为止，然后按体积分数为2%接种到100mL添加有生长促进因子的液体培养基中进行厌氧培养，培养基pH为5.0-5.4，培养温度为30-32℃，培养时间为34-36h。

上述培养方法中，旧金山乳杆菌为保藏编号：CGMCC No.14232的旧金山乳杆菌菌株。

上述培养方法中，所述的液体培养基mMRS培养基。培养基的组成成分为：