[发明专利]一种MALDI-TOF质谱探针在制备γ-谷氨酰转肽酶检测试剂盒中的应用

权利要求书

1.一种MALDI-TOF质谱探针在制备γ-谷氨酰转肽酶检测试剂盒中的应用，其特征在于：式I为MALDI-TOF质谱探针，式II为内标，所述的式I和式II的结构式具体如下：

2.如权利要求1所述的一种MALDI-TOF质谱探针在制备γ-谷氨酰转肽酶检测试剂盒中的应用，其特征在于，具体步骤如下：

a、配置不同浓度的GGT酶标准品的PBS溶液，每种浓度的PBS溶液中均加入式I的分子探针的储备液，发生不同程度的酶切反应；之后加入式II的内标溶液，混匀后取1μL样品与1μL基质在靶板上混合，干燥后进样分析；

b、制作标准曲线：以步骤a中GGT酶的不同活性值为横坐标，以步骤a中所述式II的MALDI信号强度占所述式I和式II信号总强度的比值为纵坐标，绘制标准曲线；

c、检测待测样品中xz的GGT酶的含量：将步骤a中的GGT酶标准品替换为待测样品，取样进行MALDI质谱分析，将测定的I_II/I_I+I_II带入步骤所述b中所得曲线，即可得到待测样品中的GGT酶的含量。

3.如权利要求2所述的一种MALDI-TOF质谱探针在制备γ-谷氨酰转肽酶检测试剂盒中的应用，其特征在于：步骤c所述的待测样品溶液为PBS缓冲溶液，按所述步骤a的所述方法处理。

4.如权利要求2所述的一种MALDI-TOF质谱探针在制备γ-谷氨酰转肽酶检测试剂盒中的应用，其特征在于：步骤c所述的待测样品为含有大量的盐、蛋白、核酸、表面活性剂容易干扰质谱信号的样品，在步骤a所述的加入式II的分子探针内标溶液后，再加入磁性纳米材料对式I的分子探针和式II的内标分子进行装载，一步磁性分离和洗脱，将得到的样品与基质混匀干燥后进行MALDI分析，随后将测定的I_II/I_I+I_II值带入所述步骤b中所得曲线，即可得到待测样品中的GGT酶的含量。

5.如权利要求2所述的一种MALDI-TOF质谱探针在制备γ-谷氨酰转肽酶检测试剂盒中的应用，其特征在于：所述磁性纳米材料为磁性氧化石墨烯、碳纳米管或量子点中的一种。

6.如权利要求2所述的一种MALDI-TOF质谱探针在制备γ-谷氨酰转肽酶检测试剂盒中的应用，其特征在于：所述磁性纳米材料为磁性氧化石墨烯，磁性氧化石墨烯的终浓度为0.5mg/mL。

7.如权利要求2所述的一种MALDI-TOF质谱探针在制备γ-谷氨酰转肽酶检测试剂盒中的应用，其特征在于：所述步骤a中分子探针储备液和内标溶液的溶剂为水、甲醇和二甲基亚砜中的一种或几种。

8.如权利要求2所述的一种MALDI-TOF质谱探针在制备γ-谷氨酰转肽酶检测试剂盒中的应用，其特征在于：步骤a所述的酶切时间为0.5～3h。