[发明专利]一种以化橘红为基础制备多糖的方法

说明书

本发明公开了一种以化橘红为基础，制备化橘红多糖的方法。具体方法如下：将化橘红干果在50～60℃下低温烘干,粉碎，过筛,得到化橘红粉末，经石油醚脱脂，80％乙醇弃除单糖和苷类后，将化橘红粉末置于热水中浸提，经过滤，浓缩，醇沉，脱蛋白后得到化橘红粗多糖，然后由季铵盐十六烷基三甲基溴化铵纯化得到酸性多糖，中性多糖，碱性多糖。本发明具有工艺简单，操作方便，纯度、收率高，可工业化的特点。此外，所得的化橘红多糖可广泛用抗氧化、抗肿瘤、降血糖、降血脂、医药生产原料等领域。

技术领域

本发明属于中药领域，具体涉及一种以化橘红为基础制备多糖的方法及其应用。

背景技术

多糖是除了蛋白质和核酸除外的一类重要的生物高分子化合物。现代药理研究表明多糖具有多种生理活性，包括抗氧化，抗病毒，抗肿瘤，降血糖血脂，保护心脑血管，增强免疫功能等。因大多数植物来源的多糖均无不良反应物质，不会对机体产生较大的副作用，因此，从植物中提取分离的多糖在生物医药界引起了极大的关注。目前已对百余种植物多糖进行了相关活性的研究报道，现已确证糖类作为信息分子在受精、发生、发育、分化、神经系统和免疫系统衡态的维持等方面的重要作用。炎症和自身免疫疾病、老化、癌细胞的异常增殖和转换、病原体感染、植物和病原体相互作用、植物与根瘤菌共生等生理和病理过程都有糖类的介导。随着研究的不断深入，多糖作为食品，保健品，医药等领域的研究热点，具有良好的开发研究的前景。

化橘红(Exocarpium citri grandis)又称化州橘红，是芸香科植柑橘属(Citrus)植物化州柚(Citrus grandis Osbeek)或柚(C.grandis Osbeek)的未成熟或成熟的干燥外层果皮。目前，已知化橘红果皮的提取物具有抗氧化、抗过敏、降血压及抗肿瘤等生物活性。而现有的化橘红产品主要为三种，第一种是摘取前期细嫩小果制成成药。可以用配成药方，也可以泡饮。第二种是化橘红制剂，主要功效为化痰止咳。这类产品很多，如止咳橘红胶囊、止咳橘红口服液、橘红颗粒及橘红痰咳液等产品。第三种是化橘红工艺品，其生产的品种有瓶、罐、盒、烟斗等。但是目前对化橘红多糖的研究报道较为稀少，相关的专利报道也几乎没有。大多数天然活性多糖是无毒作用的天然绿色产品，随着研究的不断深入，需求亦会越来越大。

发明内容

本发明的目的是针对化橘红深加工利用的不足，提供一种以化橘红为原料制备化橘红粗多糖和精制多糖的方法，具有方法简便，可工业化，纯品收率、纯度高的特点。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

1.一种以化橘红为基础制备多糖的方法，其特征在于，包括如步骤：

步骤一、预处理：将化橘红干果，在低温烘干,粉碎，过40-50目筛，得到黄化橘红粉末，加入石油醚，浸泡过夜，过滤，弃除石油醚，粉末挥干溶剂，加入体积分数为80％乙醇于80℃下水浴浸泡1h，弃除单糖和苷类，过滤，得到滤液与滤渣，滤液可用于制备柚皮苷，滤渣挥干溶剂，备用；

步骤二、提取：以水为溶剂，将预处理后的化橘红粉末置于水浴中浸泡提取，过滤，得滤液；

步骤三、浓缩：用真空旋转蒸发浓缩滤液；

步骤四、醇沉：上述所得浓缩液中加入95％食用酒精，静置过夜，过滤，滤饼依次用无水乙醇，丙酮洗涤两遍，于60℃下真空干燥；

步骤五、脱蛋白：将步骤四干燥后所得固体用水溶解，加入三氯乙酸，搅拌，室温下静置30min，然后离心取上清液，用氢氧化钠溶液调节至中性，加入95％食用酒精，静置过夜，过滤，洗涤，于60℃下真空干燥，得到粗多糖；

步骤六、纯化：取粗多糖加水溶解，加入十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)，置过夜，4000r/min离心15min，得到沉淀和上清液；