[发明专利]一种脱细胞异体真皮基质及在阴茎增粗中的应用

权利要求书

1.一种脱细胞异体真皮基质的制备方法，其特征在于，所述制备方法由如下步骤组成：

步骤一，将异体皮原料投入酶溶液中，浸泡振荡处理，得半成品A；所述酶为磷脂酶和蛋白酶；其中，所述磷脂酶为磷脂酶A1、磷脂酶A2、磷脂酶C、磷脂酶D按照质量比为1:1:1:1的混合物；所述蛋白酶为胰蛋白酶；

所述酶溶液pH值为7.0-8.0；

所述磷脂酶浓度为0.1g/L-0.4g/L；

所述蛋白酶的浓度为0.1g/L-0.3g/L；

步骤一所述振荡处理的条件为振荡0.5-4小时，振荡转速为10-200rpm，温度为10-40℃；

步骤二，将半成品A取出，用生理盐水浸泡，振荡处理，得半成品B；

步骤三，将半成品B投入表面活性剂溶液中，超声浸泡处理，得半成品C；所述表面活性剂溶液中含有0.1-0.3g/L的SDS，或所述表面活性剂溶液中含有0.1-0.3g/L的Triton X-100；

步骤四，将半成品C用生理盐水浸泡，振荡处理，得半成品D；

步骤五，将半成品D投入盛有DNA水解酶溶液的容器中，振荡处理，得半成品E；

步骤六，将半成品E用生理盐水浸泡，振荡处理，得半成品F；

步骤七，将半成品F用注射用水清洗浸泡，得成品G；或者，进一步地，还包括以下步骤：

步骤八，将成品G取出，包装，灭菌，得成品H；或者将成品G取出，置于含有冻干保护剂的溶液中进行冷冻干燥；包装，灭菌，得成品H；

其中，所述步骤二、步骤四、步骤六、振荡处理条件为振荡1-2小时，振荡转速为80-150rpm，更换生理盐水，继续振荡处理，重复该操作4-6次，温度为1-5℃；和/或，

所述步骤七注射用水清洗浸泡条件为振荡2小时，振荡转速为80-150rpm，温度为1-5℃，更换注射用水，继续振荡处理，重复该操作4-6次。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤三所述超声浸泡的条件为：40-80KHz，100-400W，温度为1-20℃，超声3-8分钟，浸泡2-4小时，重复2-4次。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤五中所述DNA水解酶溶液的浓度为4-8g/L，pH 7.0-8.0；和/或，

所述步骤五中振荡处理条件为振荡2-8小时，振荡转速为10-200rpm，温度为10-40℃。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤五中所述DNA水解酶溶液的浓度为4-6g/L。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤八所述冻干保护剂溶液由磷酸盐缓冲液、透明质酸和糖组成，其中透明质酸的浓度为0.4-0.8mg/100mL，糖的浓度为10-20mg/100mL，所述糖为海藻糖、乳糖、蔗糖、甘露糖、葡萄糖中的一种或几种。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤八所述磷酸盐缓冲液浓度为10mmol/L、pH为7.0。

7.根据权利要求1-6任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤八所述冷冻干燥包括：将成品G于5℃进箱，保持1小时，降温到-40℃并保持1小时，升温到-18℃并保持1小时，再次降温至-35℃保持1小时，启动真空泵，将干燥箱真空度抽到5-10Pa；用2小时将隔板升温到-30℃，干燥箱真空度抽到1-5Pa，维持15h；用1小时将隔板升温到0℃，并维持10h后，测定压力升，直至压力升小于1pa；用1小时将隔板升温到10℃，并维持10h，测定压力升，直至压力升小于1pa；用0.5小时将隔板升温到25℃，并维持8h，测定压力升，直至压力升小于1pa；整个干燥过程中前箱真空度不应高于30Pa。

8.权利要求1-7任一项所述方法制备的脱细胞异体真皮基质。

9.根据权利要求8所述的脱细胞异体真皮基质，其中，所述脱细胞异体真皮基质的缝合强度为16N-18N。