[发明专利]一种雄蜂蛹多肽提取物在审
申请号: | 201810130220.4 | 申请日: | 2018-02-08 |
公开(公告)号: | CN108504715A | 公开(公告)日: | 2018-09-07 |
发明(设计)人: | 全盈园 | 申请(专利权)人: | 金华市铁骑士生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P39/00 | 分类号: | C12P39/00;C12P21/06;C07K1/34;C07K1/14;B01J20/24;B01J20/28;C12R1/125;C12R1/685 |
代理公司: | 北京华识知识产权代理有限公司 11530 | 代理人: | 赵永强 |
地址: | 321000 浙江省金*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 雄蜂蛹 多肽提取物 发酵液 酶解液 超滤 多肽 蒸馏水 上清液浓缩 提取物制备 阿拉伯糖 发酵培养 复合菌种 提取效率 雄蜂蛹粉 振荡吸附 苦味 超滤膜 蛋白粉 壳寡糖 石油醚 灭菌 得率 过筛 脱苦 接种 冷却 无毒 蛋白 安全 | ||
1.一种雄蜂蛹多肽提取物,其特征在于:所述提取物的制备方法包括以下步骤:
1)预处理:将雄蜂蛹粉碎,过筛得到雄蜂蛹粉,然后加入石油醚,加热回流,即得雄蜂蛹蛋白;
2)雄蜂蛹蛋白酶解:向雄蜂蛹蛋白粉中加入蒸馏水,混合均匀后灭菌,冷却至室温,然后调节溶液的pH,接种复合菌种,再加入阿拉伯糖,发酵培养得发酵液,备用;
3)超滤:将酶解液经超滤膜进行超滤得到超滤酶解液,备用;
4)分离:向发酵液中加入壳寡糖,振荡吸附,离心,上清液浓缩,冷冻干燥即为雄蜂蛹多肽。
2.根据权利要求1所述的一种雄蜂蛹多肽提取物,其特征在于:所述步骤1中雄蜂蛹粉和石油醚的料液比为1:5-8(g/mL),加热回流5-6h。
3.根据权利要求1所述的一种雄蜂蛹多肽提取物,其特征在于:所述步骤2中复合菌种为重量比为1:0.3-0.4:0.2-0.3的枯草芽孢杆菌、黑曲霉和酵母菌,接种量为0.8-1.2%,发酵培养温度为25-35℃、时间为25-30h。
4.根据权利要求1所述的一种雄蜂蛹多肽提取物,其特征在于:所述步骤2中阿拉伯糖的加入量为复合菌种总量的0.02-0.5%,阿拉伯糖含有0.1-1.5%的D-阿拉伯糖。
5.根据权利要求4所述的一种雄蜂蛹多肽提取物,其特征在于:所述步骤4中壳寡糖的添加量为0.1-0.2mg/mL,振荡吸附温度为30-40℃、时间为25-35min。
6.根据权利要求1所述的一种雄蜂蛹多肽提取物,其特征在于:所述步骤4中壳寡糖为壳寡糖磁性粒子,其制备方法为:
步骤1:按料液比为1:12-16(g/L)将壳聚糖加入水中,调节其pH至4.5-5.5,然后按加酶量为5-7%加入复合酶,复合酶中木瓜蛋白酶和纤维素酶的配比为1:0.4-0.6,在温度为40-50℃的条件下酶解4-6h,酶解过程中辅以过氧化氢降解,随后调节酶解液的pH值至中性,沉淀未降解的壳聚糖,上清液浓缩,真空干燥得到水溶性的壳寡糖;
步骤2:将0.4-0.6重量份壳寡糖溶于18-22重量份去离子水中,再加入0.2-0.3重量份Fe3O4磁粒子,在超声波功率为、的条件下超声处理1-2min,然后在搅拌下缓慢加入70-90重量份液体石蜡和3-5重量份吐温80,在700-1000rpm条件下搅拌20-40min,再加入4-6重量份戊二醛,继续搅拌2-3h,再置于50-70℃下保温1.5-2.5h,产物用石油醚、丙酮、去离子水反复洗涤,最后在35-45℃真空干燥,即得壳寡糖磁性粒子。
7.根据权利要求6所述的一种雄蜂蛹多肽提取物,其特征在于:所述过氧化氢溶液加入时间为酶解结束前50-70min,过氧化氢溶液的浓度为8-12%,H2O2和酶液的体积比为1:6-10。
8.根据权利要求6所述的一种雄蜂蛹多肽提取物,其特征在于:所述过氧化氢溶液中含有0.2-0.3mM的儿茶酚和0.01-0.1mM鞣花酸。
9.根据权利要求1至7任一项所述雄蜂蛹多肽提取物作为产品或原料可应用于食品、医药、保健品领域。
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