[发明专利]一种从酵母菌发酵液中提取抗菌肽的方法

权利要求书

1.一种从酵母菌发酵液中提取抗菌肽的方法，包括发酵、抗菌肽分离，其特征在于：所述抗菌肽分离步骤为：向发酵液中加入壳寡糖，振荡吸附，离心，上清液浓缩，冷冻干燥即为多肽，所述壳寡糖为壳寡糖磁性粒子。

2.根据权利要求1所述的一种从酵母菌发酵液中提取抗菌肽的方法，其特征在于：所述壳寡糖的添加量为0.1-0.2mg/mL，振荡吸附温度为30-40℃、时间为25-35min。

3.根据权利要求1所述的一种从酵母菌发酵液中提取抗菌肽的方法，其特征在于：所述壳寡糖磁性粒子的制备方法为：

步骤1：按料液比为1:12-16（g/L）将壳聚糖加入水中，调节其pH至4.5-5.5，然后按加酶量为5-7%加入复合酶，复合酶中木瓜蛋白酶和纤维素酶的配比为1:0.4-0.6，在温度为40-50℃的条件下酶解4-6h，酶解过程中辅以过氧化氢降解，随后调节酶解液的pH值至中性，沉淀未降解的壳聚糖，上清液浓缩，真空干燥得到水溶性的壳寡糖；

步骤2：将0.4-0.6重量份壳寡糖溶于18-22重量份去离子水中，再加入0.2-0.3重量份Fe3O4磁粒子，在超声波功率为、的条件下超声处理1-2min，然后在搅拌下缓慢加入70-90重量份液体石蜡和3-5重量份吐温80，在700-1000rpm条件下搅拌20-40min，再加入4-6重量份戊二醛，继续搅拌2-3h，再置于50-70℃下保温1.5-2.5h，产物用石油醚、丙酮、去离子水反复洗涤，最后在35-45℃真空干燥，即得壳寡糖磁性粒子。

4.根据权利要求3所述的一种从酵母菌发酵液中提取抗菌肽的方法，其特征在于：所述过氧化氢溶液加入时间为酶解结束前50-70min，过氧化氢溶液的浓度为8-12%，H2O2和酶液的体积比为1:6-10。

5.根据权利要求4所述的一种从酵母菌发酵液中提取抗菌肽的方法，其特征在于：所述过氧化氢溶液中含有0.2-0.3mM的儿茶酚和0.01-0.1mM鞣花酸。

6.根据权利要求1所述的一种从酵母菌发酵液中提取抗菌肽的方法，其特征在于：所述发酵步骤为：按料液比为1:15-25（g/mL）将植物脱脂蛋白粉溶于水中，在115-125℃下灭菌20-30min，冷却至室温，然后按接种量为8-12%接种啤酒酵母，再加入啤酒酵母重量0.02-0.5%的阿拉伯糖，然后在25-35℃的条件下培养30-40h得酵母菌发酵液，备用。

7.根据权利要求6所述的一种从酵母菌发酵液中提取抗菌肽的方法，其特征在于：所述阿拉伯糖含有0.1-1.5%的D-阿拉伯糖。