[发明专利]海藻活性提取物及其用途

权利要求书

1.海藻活性提取物，其制备方法包括：预处理、脱脂、发酵、提取、纯化、洗涤，其特征在于：所述发酵步骤为：将海藻脱脂残渣与蒸馏水按照1g:18-20mL的固液比混合，调节混合液pH至6.5-6.8并灭菌，待混合液温度降至室温后，接入海滨芽孢杆菌种子液进行发酵，种子液接种量为5-8%，发酵结束后，离心取上清液即为海藻发酵液。

2.根据权利要求1所述的海藻活性提取物，其特征在于：所述发酵步骤的蒸馏水中含有0.5-0.8‰的4-羟基苯甲醇与0.1-0.16‰的间氯苯丙酮。

3.根据权利要求1所述的海藻活性提取物，其特征在于：所述发酵步骤中的发酵温度为38-42℃，摇床转速为80-150r/min，发酵时间为10-16小时。

4.根据权利要求1所述的海藻活性提取物，其特征在于：所述预处理步骤为：将采获的新鲜海藻用自来水清洗，晾晒后于55-60℃烘箱中烘48-60小时得到干燥海藻，粉碎后过80-120目筛得海藻干粉。

5.根据权利要求1所述的海藻活性提取物，其特征在于：所述脱脂步骤为：在海藻干粉中加入8-10倍分析纯丙酮，搅拌脱脂3-4小时，离心弃去上清液，沉淀中再加入海藻干粉4-5倍的分析纯丙酮，重复以上操作，最后所得残渣在常温下挥干丙酮并回收。

6.根据权利要求1所述的海藻活性提取物，其特征在于：所述提取步骤为：将海藻发酵液低温脱水得发酵液浸膏，按质量体积比为1g:5-10mL将体积分数90-95%的乙醇溶液加入到发酵液浸膏中，于65-70℃水浴中提取15-30分钟，过滤后取滤渣按同样条件水浴加热提取2-3次，收集滤渣；在滤渣中加入12-15倍重量份的蒸馏水，于55-60℃水浴中提取45-60分钟，过滤后取滤渣按同样条件水浴加热提取2-3次，合并滤液并低温浓缩得浓缩液。

7.根据权利要求6所述的海藻活性提取物，其特征在于：所述提取步骤中，发酵液浸膏的密度为1.1-1.2g/mL。

8.根据权利要求1所述的海藻活性提取物，其特征在于：所述纯化步骤为：将氯仿、正丁醇、乙酸、酒石酸二甲酯混合均匀得混合溶液，在不断搅拌下，按照体积比2-4:1的比例将混合溶液缓慢倒入浓缩液中，密封后用磁力搅拌器缓慢搅拌20-30分钟，倒入分液漏斗中，静止分层后收集上层溶液，并离心分离出变性蛋白，按上述步骤重复操作2-3次，使提取液中的蛋白质脱除完全即得海藻糖粗提液。

9.根据权利要求8所述的海藻活性提取物，其特征在于：所述纯化步骤中，氯仿、正丁醇、乙酸、酒石酸二甲酯的体积比为80-85:12-15:1:0.2-0.25，酒石酸二甲酯中L-酒石酸二甲酯与D-酒石酸二甲酯的比例为15.5-15.8:1。

10.海藻活性提取物的用途，其特征在于：所述海藻活性提取物及其复合物在土壤土质改良剂中的用途。