[发明专利]海藻活性提取物及其用途

说明书

本发明公开了海藻活性提取物，其制备方法包括：预处理、脱脂、发酵、提取、纯化，首先将新鲜海藻经清洗、晾晒、干燥、粉碎得海藻干粉，在海藻干粉中加入分析纯丙酮进行脱脂，在脱脂残渣与蒸馏水的混合液中接种入海滨芽孢杆菌进行发酵，将发酵液脱水后先后进行醇提与水提，在提取浓缩液中加入氯仿、正丁醇、乙酸、酒石酸二甲酯的混合溶液进行纯化，经洗涤干燥后即得海藻活性提取物。本发明还公开了海藻活性提取物在土壤土质改良剂中的用途。有益效果为：海藻活性提取物中海藻糖的含量可达93‑95%，大大提高了海藻糖的利用价值，海藻提取物应用于土壤土质改良剂中可改善土壤微环境，改善土壤土质。

技术领域

本发明涉及海藻深加工领域，尤其是涉及海藻活性提取物及其用途。

技术背景

“海藻”是海带、紫菜、裙带菜、石花菜等海洋藻类的总称，是生长在海中的藻类，是植物界的隐花植物，藻类包括数种不同类以光合作用产生能量的生物。它们一般被认为是简单的植物，主要特征为：无维管束组织，没有真正根、茎、叶的分化现象；不开花，无果实和种子；生殖器官无特化的保护组织，常直接由单一细胞产生孢子或配子；以及无胚胎的形成。由于与陆地植物有不同的代谢途径和代谢产物，海藻的化学成分复杂，种类多，据报道有60 多种，包括大量钙、铁、镁、锌等矿质营养元素，褐藻淀粉、岩藻多糖、褐藻糖胶、木聚糖、葡聚糖等海藻多糖，还有糖醇、氨基酸、维生素、细胞色素、甜菜碱以及酚类化合物等，此外，还含有生长素、细胞激动素、赤霉素、脱落酸等天然激素类物质。

发明内容

本发明的目的在于提供海藻活性提取物及其用途，海藻活性提取物的提取方法简单易行，提取过程强化了海滨芽孢杆菌的发酵能力，强化糖与结合蛋白的分离，提高了分离效率，还可以大大降低海藻糖以蛋白质渠道被分离出去的概率，提高海藻糖的得率与含量，海藻活性提取物及其复合物可应用于土壤土质改良剂。

本发明所用的微生物及其购买企业为：海滨芽孢杆菌，上海酶研生物科技有限公司。

本发明针对背景技术中提到的问题，采取的技术方案为：海藻活性提取物，其制备方法包括：预处理、脱脂、发酵、提取、纯化、洗涤，具体包括以下步骤：

预处理：将采获的新鲜海藻用自来水清洗4-5次，在26-30℃温度下晾晒3-5天，于55-60℃烘箱中烘48-60小时得到干燥海藻，粉碎后过80-120目筛得海藻干粉；预处理可将附着在海藻表层的盐分、贝类、沙土等污物清洗干净，然后将海藻制成粉状有助于后续操作；

脱脂：在海藻干粉中加入8-10倍分析纯丙酮，搅拌脱脂3-4小时，以4000-5000r/min离心5-8分钟，弃去上清液，沉淀中再加入海藻干粉4-5倍的分析纯丙酮，重复以上操作，最后所得残渣在常温下挥干丙酮并回收；以分析纯级丙酮脱脂简单易控，不会破坏海藻中活性物质的结构与性质，同时丙酮可以回收再利用，降低了成本；

发酵：将海藻脱脂残渣与蒸馏水按照1g:18-20mL的固液比混合，调节混合液pH至6.5-6.8，121-122℃灭菌15-18分钟，待混合液温度降至室温后，接入海滨芽孢杆菌种子液进行发酵，种子液接种量为5-8%，在38-42℃、80-150r/min条件下发酵10-16小时，发酵结束后，离心取上清液即为海藻发酵液；通过海滨芽孢杆菌发酵处理，海藻脱脂残渣中的糖与结合蛋白会分离，蛋白质进一步降解为多肽及氨基酸等小分子，其中的活性糖分得以保留，方便后续对糖分的提取；

提取：将海藻发酵液低温脱水至密度为1.1-1.2g/mL得发酵液浸膏，按质量体积比为1g:5-10mL将体积分数90-95%的乙醇溶液加入到发酵液浸膏中，于65-70℃水浴中提取15-30分钟，过滤后取滤渣按同样条件水浴加热提取2-3次，收集滤渣；在滤渣中加入12-15倍重量份的蒸馏水，于55-60℃水浴中提取45-60分钟，过滤后取滤渣按同样条件水浴加热提取2-3次，合并滤液并低温浓缩得浓缩液；醇提与水提结合可以大大提高海藻多糖的得率，不会破坏多糖的结构，同时提取溶剂容易除去，不会增加除杂工序；