[发明专利]一种五岭龙胆种子再生体系建立及快速繁育方法

说明书

本发明提供一种五岭龙胆种子再生体系建立及快速繁育方法，解决现有技术中五岭龙胆野生资源少，药用价值好，自然繁衍能力、传播扩散能力不强，自然更新困难、优良种苗稀缺等问题，采集饱满成熟度为80‑90%未开裂的五岭龙胆蒴果，放入保鲜袋包好，带回实验室后去除蒴果周围的杂质，用洗涤剂漂洗干净以及进行消毒处理后，用消毒滤纸吸干表面水分，用手术刀纵切果实,镊子夹取种子，将种子均匀接种到培养基上。经芽诱导培养、芽增殖培养；诱导无根苗生根，生根率可达100%，幼苗移栽湿度应保持在75％～85％，避免阳光直射，成活率可达99%以上；成苗移植后成活率高，节约了大量成本，幼苗健壮挺拔，长势良好，整齐一致。

技术领域

本发明属于植物繁殖领域，具体涉及一种五岭龙胆种子再生体系建立及快速繁育方法。

背景技术

五岭龙胆（Gentiana davidii）又称落地荷花、歇地龙胆、鲤鱼胆、矮杆鲤鱼胆，龙胆科龙胆属多年生草本植物，高10-20厘米。叶对生，矩圆状披针形或线状披针形，长2.5-4厘米，宽0.5-1厘米，钝尖，基部变狭连合，营养枝的叶莲座状。花数朵簇生茎顶端，头状，基部被茎上部的3-5叶所包围；花萼漏斗状，裂片不等大，条状披针形；花冠漏斗状，紫色，裂片卵形，子房椭圆形，具柄。蒴果，种子灰褐色，近圆形，表面蜂窝状。生于山坡草丛、山坡路旁、林缘、林下，海拔350-2500米。产湖南、江西、安徽、浙江、福建、广东、广西。具有清热解毒，利尿，明目。用于化脓性骨髓炎，尿路感染，结膜炎；外用治疖痈。

发明内容

本发明的目的在于提供一种五岭龙胆种子再生体系建立及快速繁育方法，解决现有技术中五岭龙胆野生资源少，药用价值好，自然繁衍能力、传播扩散能力不强，自然更新困难、优良种苗稀缺等问题。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种五岭龙胆种子再生体系建立及快速繁育方法，包括如下步骤：

1）材料选取与消毒：采摘当年80-90%成熟荚果用洗涤剂漂洗干净，再置于流水中冲洗20分钟；种子消毒处理：将荚果进行清洗，置饱和漂白粉上清液中浸泡15min，并用软毛刷刷洗荚果外部，冲洗干净后，自来水下滴冲0.5-1h，双蒸水冲荡2-3次，置超净工作台内用75%酒精消毒30s后倒去酒精，加入0.1%升汞处理10-13min，将汞液倒入废汞瓶，无菌水冲3-4遍后，用消毒滤纸吸干表面水分后，待用；

2）诱导培养：取饱满经消毒处理后的荚果用枪状镊夹住荚果，手术刀顺着荚果垂直方向剖开，取出荚果内种子，分别接种于经高温、高压灭菌的芽诱导培养基中；培养条件：接种后5-8d在无灯光条件下培养，无灯光培养结束后光照强度调整为1000～1500lx，培养时间15-20d，培养室温度为23±2℃，光照时间5h/d，得到诱导芽植株；

3）增殖培养：将经上述诱导培养，所得到的生长良好的芽植株切成茎段长1.0-1.5cm，接种在增殖培养基中，光照时间10h/d，光照强度1500～2000lx，增殖培养时间20-30d，得到增殖培养的幼苗；

4）诱导生根：将增殖培养出来带有叶2-3片，株高3-4cm无根幼苗单株切下，转移到生根培养基中；光照时间10h/d，光照强度1500-2000lx，诱导生根时间15-20d，得到诱导生根的幼苗，生根率可达100%；

5）试管苗培养完成：当诱导生根培养试管苗生长至高5-6cm，根3-5条，叶5片，叶长2-3cm时完成五岭龙胆种子诱导萌发及快速微繁殖培养；

6）将完成生根培养试管瓶苗放在自然光下炼苗5-7天后，打开瓶盖炼苗1-2天，以增强试管苗对室外环境的适应能力；然后从培养瓶中取出培养植株，洗去附着在根系的残留培养基，移入蛭石和腐殖土的质量比1:2混合的基质中，保湿遮阴，温度控制在15-30℃，湿度应保持在75％-85％，避免阳光直射；2-3周后植株适应能力逐渐增强，获得自然生长健壮完整种苗。