[发明专利]一种寄树兰再生体系快速建立及保存方法

说明书

本发明提供一种寄树兰再生体系快速建立及保存方法，属于植株再生研究领域。选取成熟蒴果，漂洗干净以及消毒处理后，纵切果实，镊子夹取种子，在无菌条件下诱导原球茎生长培养，得到原球茎；将原球茎切割为2‑3cm方块接种于芽增殖培养基中，得到增殖培养幼苗；将继代增殖诱导培养出来带叶2～3片，株高3～4cm无根幼苗单株切下，转移到生根培养基中诱导生根20‑25d，得到可移栽的寄树兰幼苗。解决现有技术中寄树兰野生资源少，观赏效果好，自然繁衍能力、传播扩散能力不强，自然更新困难、优良种苗稀缺等问题，是国家二级保护植物，具有较高的园艺观赏价值，为兰科植物园林装饰以及兰花公园装饰具有重要意义。

技术领域

本发明属于植株再生研究领域，具体涉及一种寄树兰再生体系快速建立及保存方法。

背景技术

寄树兰（学名：Robiquetia succisa(Lindl.)Seidenf.et Garay）：茎坚硬，圆柱形，长达1米，粗5毫米，节间长约2厘米，下部节上具发达而分枝的根。叶二列，长圆形，先端近截头状并且啮蚀状缺刻。花序与叶对生，比叶长，常分枝，圆锥花序密生许多小花；花不甚开放，萼片和花瓣淡黄色或黄绿色，质地较厚；花瓣较小，宽倒卵形，先端钝；唇瓣白色，3裂；侧裂片直立，耳状，长约4毫米，宽2毫米，先端钝并且带紫褐色，边缘稍波状。蒴果长圆柱形，成熟后倒垂。花期6-9月，果期7-11月。

生于海拔570-1150米的疏林中树干上或山崖石壁上。分布于中国、锡金、不丹、印度东北部、缅甸、泰国、老挝、柬埔寨、越南。具有较高的园艺观赏价值，为兰科植物园林装饰以及兰花公园装饰具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种寄树兰再生体系快速建立及保存方法，解决了现有技术中寄树兰野生资源少，观赏效果好，自然繁衍能力、传播扩散能力不强，自然更新困难、优良种苗稀缺等问题，是国家二级保护植物，具有较高的园艺观赏价值，为兰科植物园林装饰以及兰花公园装饰具有重要意义。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种寄树兰再生体系快速建立及保存方法，具体包括如下步骤：

1）材料选取与消毒：采摘当年80-90%成熟荚果用洗涤剂漂洗干净，再置于流水中冲洗20分钟；种子消毒处理：将荚果进行清洗，置饱和漂白粉上清液中浸泡15min，并用软毛刷刷洗荚果外部，冲洗干净后，自来水下滴冲0.5～1h，双蒸水冲荡2～3次，置超净工作台内用75%酒精消毒30s后倒去酒精，加入0.1%升汞处理8～10min，将汞液倒入废汞瓶，无菌水冲3～4遍后，用消毒滤纸吸干表面水分后即可进行接种；

2）原球茎诱导培养：取饱满经消毒处理后的荚果，用枪状镊夹住荚果，手术刀顺着荚果垂直方向剖开，取出荚果内种子，分别接种于经高温、高压灭菌的原球茎诱导培养基中；培养条件：培养温度为23±2℃，无光培养79d后，第80d光照时间设置3h，光照强度500～1000lx,之后10d光照时间5h，光照强度500～1000lx，培养时间90d，得到生长原球茎；

3）增殖培养：将经上述诱导培养，所得到原球茎切成2-3cm方块，分别接种于芽增殖培养基中，光照时间8h/d，光照强度100～1500lx，增殖培养时间20-30d，得到增殖培养幼苗；

4）诱导生根：将步骤3）培养出来的带有叶2～3片、株高3～4cm无根幼苗单株切下，转移到生根培养基中；光照时间10h/d，光照强度1500～2000lx，诱导生根时间20-25d；

5）试管苗培养完成：当诱导生根培养试管苗生长至高5-6cm，根3～5条，叶5片，叶长2～3cm时完成寄树兰种子诱导发芽及快速繁殖培养；