[发明专利]人泌乳素检测试剂盒及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种人泌乳素均相检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述方法包括：

制备第一组分，所述第一组分包含受体以及与之结合的第一结合单元，所述受体能够与单线态氧反应生成可检测信号，所述第一结合单元能够结合人泌乳素的第一表位；

制备第二组分，所述第二组分包含第一标记物以及与之结合的第二结合单元，所述第二结合单元能够结合人泌乳素的第二表位，所述第二表位与所述第一表位是人泌乳素的不同结合特性的表位或者不同位置的相同结合特性的表位；

制备第三组分，所述第三组分包含供体以及与之结合的所述第一标记物的特异结合物，所述供体能够在激发状态产生单线态氧。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：

所述第一结合单元和所述第二结合单元分别独立选自与所述人泌乳素具有结合特异性的单克隆抗体、抗体结合片段、人工抗体、修饰的抗体、两种或更多种单克隆抗体混合物和多克隆抗体，优选选自多克隆抗体和/或单克隆抗体。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：

所述标记物为生物素，所述标记物的所述特异结合物为链霉亲和素。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：

所述受体包含烯烃化合物和金属螯合物，其为非粒子形式，且在含水介质中可溶；或，所述受体为填充有发光化合物和镧系元素的高分子微粒；和/或，

所述供体为光活化的或化学活化的敏化剂，其为非粒子形式，且在含水介质中可溶；和/或，所述供体为填充有感光化合物的高分子微粒，在光激发下能够产生单线态氧。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括：

制备第一组合物，所述第一组合物包括所述第一组分和第一缓冲液；

制备第二组合物，所述第二组合物包括所述第二组分和第二缓冲液；

制备第三组合物，所述第三组合物包括所述第三组分和第三缓冲液；

优选地，所述第一缓冲液、所述第二缓冲液与所述第三缓冲液分别独立地选自pH 8.0，0.1M Tris-HCl溶液。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述第一组合物的制备方法包括：

步骤S1，利用碳酸盐缓冲液将所述受体稀释至4～6mg/mL，获得受体溶液；

步骤S2，在所述受体溶液中加入第一抗人泌乳素抗体或其结合片段，静止后再加入用碳酸盐缓冲液稀释至8～12mg/mL的BSA溶液，获得与所述第一抗人泌乳素抗体或其结合片段结合的受体溶液；

步骤S3，分离与所述第一抗人泌乳素抗体或其结合片段结合的受体溶液中的与所述第一抗人泌乳素抗体或其结合片段结合的所述受体，并加入第一缓冲溶液，获得所述第一组合物。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述第二组合物的制备方法包括：

步骤T1，将第二抗人泌乳素抗体或其结合片段置于透析袋内利用标记缓冲液进行透析，透析结束后加入生物素溶液，并补入透析缓冲液，静止，获得与生物素结合的第二抗人泌乳素抗体或其结合片段；

步骤T2，将与生物素结合的第二抗人泌乳素抗体或其结合片段置于透析袋内利用透析缓冲液进行透析，透析结束后加入第二缓冲液，获得所述第二组合物。

8.一种用于均相检测人泌乳素的试剂盒，其是根据权利要1-7中任一项所述的人泌乳素均相检测试剂盒的制备方法制备得到的。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于：

所述第一组合物中的所述第一组分的浓度选自：10～300μg/mL，优选20～200μg/mL，更优选30～80μg/mL，和/或

所述第二组合物中的所述第二组分的浓度选自：0.5～15μg/mL，优选1～8μg/mL，更优选2～6μg/mL；和/或

所述第三组合物中的所述第三组分的浓度选自：10～300μg/mL，优选20～200μg/mL，更优选30～80μg/mL。