[发明专利]用于香榧苗期性别鉴定的特异性分子标记TGMI001有效
| 申请号： | 201810144040.1 | 申请日： | 2018-02-12 |
| 公开（公告）号： | CN108165652B | 公开（公告）日： | 2020-04-07 |
| 发明（设计）人： | 卢江杰;刘玉洋;叶生月;张敏;吴水木 | 申请（专利权）人： | 杭州师范大学;桐庐县农业产业化办公室;景宁嘉树农业科技开发有限公司;桐庐翌鑫农业开发有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 杭州君度专利代理事务所(特殊普通合伙) 33240 | 代理人： | 黄前泽 |
| 地址： | 310018 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 香榧 苗期 性别 鉴定 特异性 分子 标记 tgmi001 | ||
1.用于香榧苗期性别鉴定的特异性分子标记TGMI001，其特征在于扩增该分子标记的扩增引物如下：
上游引物TGMI001-F，如SEQ.ID No1所示；
下游引物TGMI001-R，如SEQ.ID No2所示。
2.权利要求1所述的用于香榧苗期性别鉴定的特异性分子标记TGMI001在香榧苗期进行雌雄性别鉴定的应用。
3.一种利用如权利要求1所述的特异性分子标记进行香榧苗期性别鉴定的方法，其特征在于该方法首先提取待测香榧幼苗样本的基因组DNA为模板，利用如权利要求1所述的特异性分子标记TGMI001进行PCR扩增得到扩增产物；对得到的扩增产物进行电泳检测，若电泳结果出现一条461bp的DNA条带，则待测样本为雄性个体；若电泳结果未出现一条461bp的DNA条带，则待测样本为雌性个体。
4.如权利要求3所述的鉴别方法，其特征在于PCR扩增体系包括：含Mg2+ 的10×PCRBuffer 1μL，10mmol/L dNTPs 0.3μL，10μmol/L上游引物0.5μL，10μmol/L下游引物0.5μL，5U/μL Taq酶0.2μL，20ng/μL DNA模板 1μL，ddH2O 6.5μL，共10μL。
5.如权利要求3所述的鉴别方法，其特征在于PCR反应程序为：94℃预变性5分钟；32个循环，每个循环包括94℃变性40秒，退火温度59℃复性40秒，72℃延伸90秒；最后72℃延伸10分钟。
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